Nur mikroskopiyasi uchun qanday namunaviy spetsifikatsiyalar kerak?
Optik mikroskopning namunani tayyorlash jarayonida namunaning tilim qalinligi 2-25um; elektron mikroskopning tilim qalinligi 50-100nm ichida (namuna qalinligi 1um ga etishi mumkin boʻlgan yuqori voltli elektron mikroskopdan tashqari), shuning uchun qoʻllaniladigan kesma usuli hammasi bir xil emas.
Tashuvchi nuqtai nazaridan optik mikroskop kesimining tashuvchisi shisha slayd, elektron mikroskop kesimining tashuvchisi esa panjara hisoblanadi.
Fiksatsiyaga kelsak, optik mikroskopning bo'laklari birikma fiksator bilan, elektron mikroskopning bo'laklari esa bitta fiksator bilan qayta-qayta mahkamlanadi.
Bo'yash nuqtai nazaridan optik namunalarni bo'yash nisbatan oddiy. Turli xil kuzatish namunalari va optik mikroskoplarning turlariga ko'ra, odatda ba'zi bir qattiq bo'yash vositalari bilan bo'yash kifoya. Elektron mikroskop namunalarini qayta bo'yashning ko'plab va murakkab usullari mavjud, masalan, salbiy bo'yash, kumush bo'yash va boshqalar.
O'rnatish nuqtai nazaridan, kerosin, kollodion, jelatin va boshqalar optik mikroskop bo'limlari uchun joylashtirish vositalari sifatida ishlatiladi; epoksi qatroni, polistirol qatroni, izobutilen qatroni va suvda eruvchan qatronlar elektron mikroskop bo'limlari uchun joylashtirish vositalari sifatida ishlatiladi.
Mikroskopning ko'rish maydoni bir tekis va to'liq yoritilishini ta'minlash uchun mikroskop birinchi marta o'rnatilganda va disk raskadrovka qilinganda yoritish optik tizimini sozlash kerak. Bu mikroskopdan to'g'ri foydalanish va to'g'ri va ishonchli natijalarni olishning muhim vositasi va eng asosiy usuli. talablar. Bundan tashqari, yorug'lik optik yo'l tizimini sozlashni to'g'ri o'zlashtirish mikroskopdan foydalanish paytida yorug'lik manbai lampochkasini almashtirgandan so'ng zarur qadamdir, shuningdek, har kuni vaqti-vaqti bilan mikroskopning ishlashini tekshirish uchun zarur vositadir. foydalanish. Mikroskopning yorug'lik optik yo'li tizimini sozlash asosan quyidagi to'rtta elementni o'z ichiga oladi: 1. Mikroskopdan tashqarida yorug'lik manbai chiroq kamerasini dastlabki sozlash ① Avval chiroq kamerasining qobig'ini oching, halogen lampochkani simga qo'yish uchun prujina klipini bosing. rozetkaga o'tkazing va lampochkani o'rnatish vaqtida barmoqlaringiz bilan bevosita aloqa qilmang (yumshoq mato yoki qog'oz bilan ajratilishi mumkin) Lampochkada barmoq izlari va boshqa kirlar mavjud bo'lib, bu lampochkaning xizmat qilish muddatiga ta'sir qiladi. ②Chiroq uyini stol ustiga qo'ying, quvvatni yoqqaningizdan so'ng, maxsus tornavida yordamida chiroqning fokus tugmasi teshigini ("←→" bilan belgilangan), filament devorga proyeksiyalanadi 1-2 m masofada va filament tasviri o'rnatiladi. Keyin chiroqning balandligini sozlang va filamentning o'rnini moslashtirish uchun ip teshigini ("──" bilan belgilangan) sozlang; keyin filamentning chap va o'ng holatini moslashtirish uchun vint teshigini ("──" bilan belgilangan) sozlash uchun chiroqning chap va o'ng holatini sozlang.
2. Mikroskopdagi yorug'lik manbai yoritgichining (filamentining) holatini tekshirish va tuzatishdan maqsad yorituvchining tasvir uchini ob'ektiv linzaning ko'rish maydoniga to'g'ridan-to'g'ri moslashtirish va ko'rish maydonini ta'minlashdan iborat. mikroskop yorug'lik manbai nuqtai nazaridan to'liq va bir xilda yoritilgan. Kuhler yoritish tizimini sozlash uchun zaruriy shart bo'lgan yoritish. Kerakli asosiy asboblar: markazlashtiruvchi teleskop mikroskop sotib olinganda jihozlangan. ① Chiroq uyidagi muzlagan shisha gilzani elektrdan ajratib oling va chiroq uyini mikroskopga qaytaring. ② 10 × ob'ektiv linzani tanlang, namunani topish va uni aniq fokuslash uchun yorug'lik manbai dasturini yoqing, so'ngra namunani aniq fokuslash uchun 40 × ob'ektiv linzadan foydalaning (40 × ob'ektiv linza Filamaning butun rasmini ko'rishingiz mumkin) ); ③ Kondenserning diafragma diafragmasini va maydon diafragmasini maksimal darajada oching; ④ Okuyarlardan birini ajratib oling, markazlashtiruvchi teleskop bilan almashtiring, oq qismini ushlang, ikkinchi qo'lingiz bilan qora okulyarni cho'zing, ko'rish sohasida filament tasvirini ko'rishingiz mumkin; ⑤ Agar filamentning joylashuvi mos bo'lmasa, filament tasvirini gorizontal yo'nalishda sozlash uchun "──" teshigini sozlang va filament tasvirini to'g'rilashgacha vertikal yo'nalishda filament tasvirini rostlash uchun "──" teshigini sozlang. faqat ob'ektiv linzaning diafragmasini to'ldiradigan engil dumaloq tasvirga; ⑥ Sozlashdan so'ng muzli shisha gilzani dastlabki holatiga qaytaring, markazlashtiruvchi teleskopni elektr tarmog'idan uzing va keyingi sozlash uchun okulyarni almashtiring. Yuqorida aytib o'tilgan yorug'lik manbai chiroq kamerasini mikroskopdan tashqarida sozlash va mikroskop ichidagi yorug'lik manbai yorug'lik tanasining holatini tekshirish faqat mikroskop birinchi marta o'rnatilgan va disk raskadrovka qilinganida va lampochka almashtirilganda amalga oshirilishi kerak. , va mikroskopdan foydalanganda mikroskopni tasodifiy sozlash mumkin emas. Chalkashlik bo'lsa, yuqoridagi bosqichlarga muvofiq uni asl holatiga qaytarish mumkin.
3. Kohler yorug'lik tizimini to'g'ri sozlash Mikroskopni to'g'ri sozlashning asosiy vazifalaridan biri yorug'lik optik yo'l tizimini sozlash, asosiysi esa Kohler yoritish tizimini sozlashdir. Mikroskopdan foydalanadigan har bir kishi, ayniqsa fotomikrografiya bilan shug'ullanadiganlar uchun mikroskopning funktsiyalarini to'liq o'ynash va suratga olish uchun Kuhler yoritish tizimining printsipi va uni sozlash bosqichlari haqida ma'lum bir tushuncha va mahoratga ega bo'lishi kerak. Chiqarilgan fotosuratlar ta'sir jihatidan yanada izchil va mukammal bo'lishi mumkin. Kohler yoritish tizimining printsipi oddiy: yorug'lik manbai yoritgichining har qanday nuqtasi tomonidan chiqariladigan yorug'lik mikroskopning ko'rish maydonini yoritishi mumkin va yorug'lik manbai yoritgichidagi har bir nuqta tomonidan chiqarilgan yorug'lik to'planadi va maydonda. mikroskopning ko'rinishi juda to'liq va bir xil yoritishga erishiladi. Kuhler yoritish tizimini sozlashdan maqsad kuzatilayotgan ko‘rish maydoni uchun bir xil va yetarli darajada yoritishni olish hamda adashgan yorug‘likning tasvirlash tizimiga ta’sir qilishiga yoki unga xalaqit berishiga yo‘l qo‘ymaslik, bu esa suratga olish jarayonida plyonkada tuman paydo bo‘lishiga yo‘l qo‘ymaslikdir. Yuqori sozlangan Kohler yoritish tizimi uchun zarur komponentlar: maydon diafragmasi, o'qda sozlanishi mumkin bo'lgan kondanser linzalari tizimi. ① 10× ob’ektiv va 10× okulyarni tanlang ② Kondenserning old linzasini optik yo‘lga qo‘ying, diafragma diafragmasini o‘rtacha holatga (juda katta yoki kichik emas) sozlang, so‘ng kondensatorni yuqoriga ko‘taring. yuqori holatga keltiring va kondanser aylanuvchi patnisini Yorqin maydon "J" holatiga sozlang ③ Maydon diafragmasini minimal (0,1) ga sozlang
④ Muhrlangan biologik namunani sahnaga qo'ying, yorug'lik manbasini yoqing va aniq fokuslang
⑤ Ko'rish sohasida qisman yoritilgan maydon yoki yorqin nuqta bo'ladi, bu dala diafragmasining xiralashgan tasviri bo'lib, unda namunaning tafsilotlari aniq ko'rinadi; uning tashqarisida quyuqroq ko'rish maydoni bo'lib, bu namunaning tafsilotlarini aniq ko'rish shart emas
⑥Kondensatorni biroz pastga qarab sozlang, shunda ko'rish maydonidagi yorqin nuqta asta-sekin qisqaradi va asta-sekin aniq ko'pburchak tasvirga aylanadi, bu maydon diafragmasining aniq tasviri;
⑦Umuman olganda, ko'pburchak tasvir ko'rish maydonining markazida emas va maydon diafragmasining ko'pburchak tasvirini markaziy holatga moslashtirish uchun kondensatorning bir juft markazlashtiruvchi vintlarini sozlash kerak;
⑧Ko'pburchak tasvirini ko'rish maydonining ichki ko'pburchagiga aylantirish uchun ko'rish maydonining diafragmasini asta-sekin oching va keyin tekislash holatini tekshiring. Agar hizalama ideal bo'lmasa, tekislash vintini nozik sozlashni davom eting;
⑨Ko'rish maydonining diafragmasini biroz oching, shunda uning ko'pburchak tasviri ko'rish maydonining chetida yo'qoladi. Hozircha Kohler yoritish tizimini sozlash tugallandi. Kohler yorug'lik tizimi sozlangandan so'ng, butun ko'rish maydoni teng ravishda yoritiladi va olingan mikrografiyalar oddiy kontrast bilan yorqin va aniq bo'ladi.
