Flüoresans va lazer konfokal mikroskopiya o'rtasidagi farq nima?
floresan mikroskop
1. Floresan mikroskop - ultrabinafsha nurlardan yorug'lik manbai sifatida tekshirilayotgan ob'ektni yoritib, flüoresan nurlanishni keltirib chiqaradigan, so'ngra mikroskop ostida ob'ektning shakli va holatini kuzatuvchi qurilma. Floresan mikroskopiyasi hujayra ichidagi moddalarning so'rilishi, tashilishi, tarqalishi va joylashishini o'rganish uchun ishlatiladi. Hujayralardagi ba'zi moddalar, masalan, xlorofil, ultrabinafsha nurlanish ta'siridan keyin flüoresansni chiqarishi mumkin; Ba'zi moddalarning o'zi lyuminestsent nurlar chiqarmasligi mumkin, lekin agar floresan bo'yoqlar yoki floresan antikorlar bilan bo'yalgan bo'lsa, ular ultrabinafsha nurlanish ostida ham flüoresansni chiqarishi mumkin. Floresan mikroskopiya bu moddalarni sifatli va miqdoriy tadqiq qilish vositalaridan biridir.
2. Flüoresan mikroskopning ishlash printsipi:
(A) Yorug'lik manbai: yorug'lik manbai turli to'lqin uzunlikdagi yorug'likni chiqaradi (ultrabinafshadan infraqizilgacha).
(B) qo'zg'atuvchi filtr yorug'lik manbai: qo'zg'atuvchi floresans uchun foydasiz bo'lgan yorug'likni blokirovka qilish bilan birga, namunada floresan hosil qilishi mumkin bo'lgan ma'lum bir to'lqin uzunligidagi yorug'likni o'tkazish.
(C) Floresan namunalari: odatda lyuminestsent pigmentlar bilan bo'yalgan.
(D) Bloklash filtri: namuna tomonidan so'rilmagan qo'zg'atuvchi nurni blokirovka qilish orqali floresansni tanlab o'tkazadi va ba'zi to'lqin uzunliklari ham floresansda tanlab uzatiladi. Nurlangan ob'ektdan floresansni chiqarish uchun yorug'lik manbai sifatida ultrabinafsha nurlardan foydalanadigan mikroskop. Elektron mikroskop birinchi marta 1931 yilda Germaniyaning Berlin shahrida Norr va Xarroska tomonidan yig'ilgan. Ushbu turdagi mikroskop yorug'lik nuri o'rniga yuqori tezlikda ishlaydigan elektron nurdan foydalanadi. Elektron oqimining toʻlqin uzunligi yorugʻlik toʻlqinlariga nisbatan ancha qisqa boʻlganligi sababli, elektron mikroskopning kattalashtirishi minimal ruxsat chegarasi 0,2 nanometr boʻlgan holda 800000 martaga yetishi mumkin. 1963 yilda qo'llanila boshlangan skanerlovchi elektron mikroskop odamlarga ob'ektlar yuzasidagi mayda tuzilmalarni ko'rish imkonini beradi.
3. Qo'llash sohasi: Kichik ob'ektlar tasvirlarini kattalashtirish uchun ishlatiladi. Odatda biologiya, tibbiyot, mikroskopik zarralar va boshqalarni kuzatish uchun ishlatiladi.
konfokal mikroskop
1. Konfokal mikroskop aks ettirilgan yorug'lik yo'liga yarim aks ettiruvchi linza qo'shadi, u allaqachon linzadan o'tib ketgan aks ettirilgan yorug'likni boshqa yo'nalishlarda egadi. Fokus nuqtasida pin teshigi bo'lgan to'siq bor, kichik teshik esa markazlashtirilgan nuqtada joylashgan. Qopqoqning orqasida fotoko'paytiruvchi trubka joylashgan. Tasavvur qilish mumkinki, aniqlangan yorug'lik fokus nuqtasidan oldin va keyin aks ettirilgan yorug'lik ushbu konfokal tizim orqali kichik teshikka yo'naltirilmaydi va to'siq tomonidan bloklanadi. Shunday qilib, fotometr fokus nuqtasida aks ettirilgan yorug'likning intensivligini o'lchaydi.
2. Printsip: An'anaviy optik mikroskoplar dala yorug'lik manbalaridan foydalanadi va namunadagi har bir nuqtaning tasviriga qo'shni nuqtalardan diffraktsiya yoki tarqoq yorug'lik ta'sir qiladi; Lazerli skanerlovchi konfokal mikroskop namunaning fokus tekisligidagi har bir nuqtani skanerlash uchun yoritilgan pin teshigi orqali nuqtali yorug'lik manbasini hosil qilish uchun lazer nuridan foydalanadi. Namunadagi yoritilgan nuqta aniqlash teshigida tasvirlanadi va aniqlanish teshigidan keyin fotoko'paytiruvchi trubka (PMT) yoki termoelektrik ulash moslamasi (cCCD) orqali nuqta yoki chiziq orqali qabul qilinadi va kompyuter monitorida tezda lyuminestsent tasvirni hosil qiladi. ekran. Yoritish teshigi va aniqlovchi pin teshigi ob'ektiv linzaning fokus tekisligiga nisbatan konjugatsiyalangan. Fokus tekisligidagi nuqtalar bir vaqtning o'zida yorug'lik teshigi va emissiya pin teshigiga qaratilgan va fokus tekisligidan tashqaridagi nuqtalar aniqlash teshigida tasvirlanmaydi. Bu an'anaviy mikroskopiyadagi loyqa tasvirlarning kamchiliklarini bartaraf etib, namunaning optik ko'ndalang kesimini ifodalovchi konfokal tasvirga olib keladi.
3. Qo'llash sohalari: tibbiyot, hayvonot va o'simliklar tadqiqotlari, biokimyo, bakteriologiya, hujayra biologiyasi, to'qima va embrion, oziq-ovqat fani, genetika, farmakologiya, fiziologiya, optika, patologiya, botanika, nevrologiya, dengiz biologiyasi, materialshunoslik, elektron fanlar, mexanika, neft geologiyasi va mineralogiya.
