Ikki fotonli mikroskopiya va lazerli konfokal mikroskopiya o'rtasidagi farq
Lazerli konfokal mikroskop - yorug'lik manbai sifatida lazerdan foydalanadigan kuzatish, tahlil qilish va chiqarish tizimlari to'plami, an'anaviy optik mikroskop asosida konjugat fokuslash printsipi va qurilmasi va kompyuter yordamida kuzatilgan ob'ektning raqamli tasvirini qayta ishlash. Asosiy tizimlar orasida lazerli yorug'lik manbalari, avtomatik mikroskoplar, skanerlash modullari (shu jumladan, konfokal optik yo'l kanallari va pin teshiklari, skanerlash oynalari, detektorlar), raqamli signal protsessorlari, kompyuterlar va tasvirni chiqarish qurilmalari (displeylar, rangli printerlar). Lazerli skanerlovchi konfokal mikroskopdan foydalanib, kuzatilgan namunaning tomografiyasi va tasvirini o'tkazish mumkin. Shuning uchun hujayralarning uch o'lchovli fazoviy tuzilishini zararsiz kuzatish va tahlil qilish mumkin.
Shu bilan birga, lazerli skanerlash konfokal mikroskop ham jonli hujayralarni dinamik kuzatish, bir nechta immunofluoresans yorlig'i va ionli floresan yorliqlash uchun kuchli vositadir. U spektrning mohiyatini aniq tahlil qiladi va bir-birining ustiga chiqadigan emissiya spektrlari bilan turli teglardan signallarni ajratadi.
Eng muhimi shundaki, ko'p rangli floresan bo'yash uchun u floresans o'zaro ta'sirini butunlay yo'q qilishi mumkin, shu bilan birga namunali floresan signalining yo'qolishini minimallashtiradi. Bularning barchasi oddiy oynalar erisha olmaydigan narsalardir.
Mikroskop ob'ektivi va okulyar o'rtasidagi fokus uzunligi munosabati
Turli xil printsiplar
1. Floresan mikroskop: U ultrabinafsha nurni yorug'lik manbai sifatida sinovdan o'tkazilayotgan ob'ektni yoritish uchun ishlatadi, bu esa flüoresan nurlanishni keltirib chiqaradi va keyin mikroskop ostida ob'ektning shakli va holatini kuzatadi.
2. Lazerli konfokal mikroskop: floresan mikroskopiya tasviri asosida ultrabinafsha yoki ko'rinadigan yorug'lik yordamida floresan zondlarni qo'zg'atish uchun lazerli skanerlash moslamasi o'rnatiladi.
Turli xil xususiyatlar
1. Floresan mikroskop: hujayralar ichidagi moddalarning yutilishi, tashilishi, tarqalishi va joylashishini o'rganish uchun ishlatiladi. Hujayralardagi ba'zi moddalar, masalan, xlorofil, ultrabinafsha nurlanish ta'siridan keyin flüoresansni chiqarishi mumkin; Ba'zi moddalarning o'zi floresansni chiqarmasligi mumkin, ammo floresan bo'yoqlar yoki lyuminestsent antikorlar bilan bo'yalgan bo'lsa, ular ultrabinafsha nurlanish ostida ham flüoresansni chiqarishi mumkin.
2. Lazerli konfokal mikroskop: Tasvirni qayta ishlash uchun kompyuter yordamida hujayralar yoki toʻqimalarning ichki mikrostrukturasining lyuminestsent tasvirlarini olish hamda Ca2+, pH qiymati, membrana salohiyati va hujayra morfologiyasidagi oʻzgarishlar kabi fiziologik signallarni kuzatish. subhujayra darajasida.
