Mikroskopning aniqligini qanday yaxshilash mumkin?
Mikroskop tekshirish uskunasining asosiy jihozlaridan biri bo'lib, mikroskopning ishlashini baholash uchun muhim ko'rsatkich bu o'lchamdir. Ruxsat ikki kichik nuqtani yoki ikkita chiziq orasidagi kichik masofani aniq ajratish qobiliyatini anglatadi. Inson ko'zining o'zi mikroskopdir. Standart yorug'lik sharoitida inson ko'zining fotopik masofadagi o'lchamlari (25 sm xalqaro miqyosda tan olingan) taxminan 1/10 mm ga teng. Ikki to'g'ri chiziqni ko'rish uchun ko'zning o'lchamlari ham yaxshilanishi mumkin, chunki to'g'ri chiziq bir qator nerv hujayralarini rag'batlantiradi.
Inson ko'zining o'lchamlari atigi 1/10 mm, shuning uchun 1/10 mm dan kichikroq ob'ekt yoki 1/10 mm dan yaqinroq bo'lgan ikkita kichik ob'ekt orasidagi masofani inson ko'zi ajratib bo'lmaydi. Shunday qilib, oddiy makroskopik lupadan mikroskopik kuzatish uchun optik mikroskopgacha, keyin esa elektron mikroskop paydo bo'ldi. Mikroskop o'lchamlari ta'rifi - bu namunada aniq echilishi mumkin bo'lgan ikkita kichik nuqta orasidagi kichik masofa. Uning hisoblash formulasi: D=0.61l/NA
Formulada: D - rezolyutsiya (um); l - yorug'lik manbasining to'lqin uzunligi (um); NA - ob'ektiv linzaning raqamli diafragma (ob'ektiv diafragma deb ham ataladi).
Mikroskopning o'lchamlari tushayotgan yorug'lik manbasining to'lqin uzunligi va mos keladigan ob'ektiv linzasining raqamli diafragma bilan aniqlanishi formuladan olinishi mumkin. Ko'rinib turibdiki, optik mikroskopni takomillashtirish usuli:
1. Yorug'lik manbasining to'lqin uzunligini kamaytiring.
Ko'rinadigan yorug'likning qisqaroq to'lqin uzunligi 390nm. Agar yorug'lik manbai sifatida ushbu to'lqin uzunligidagi ultrabinafsha nurlar ishlatilsa, optik mikroskopning o'lchamlari 0,2 um gacha kamayishi mumkin. Biroq, shishaning ko'p tarqalgan materiallari to'lqin uzunligi 340 nm dan past bo'lgan katta miqdordagi yorug'likni o'zlashtirganligi sababli, ultrabinafsha nurlar juda ko'p zaiflashgandan keyin aniq va yorqin tasvirni hosil qila olmaydi. Shuning uchun kvarts (200 nm gacha ultrabinafsha nurlarni o'tkaza oladigan) va ftorit (185 nm gacha ultrabinafsha nurlarni o'tkaza oladigan) kabi qimmatbaho materiallardan foydalanish kerak va ultrabinafsha nur mikroskoplarini yalang'och ko'z bilan kuzatish mumkin emas, Hatto kuzatilgan namunalar ning cheklanishi yuqori narx bilan birga, shuning uchun mikroskop o'lchamlarini yaxshilashning bu usuli o'z cheklovlari tufayli keng qo'llanilmaydi.
2. Obyektiv linzaning NA raqamli diafragmasini oshiring.
Raqamli diafragma NA=n*sin(u)
Formulada n - ob'ektiv linza va namuna o'rtasidagi muhitning sinishi ko'rsatkichi; u - ob'ektiv linzaning yarim diafragma burchagi. Shuning uchun, optik dizayn nuqtai nazaridan, kattaroq diafragma burchagidan to'g'ri foydalanish yoki sinishi indeksini oshirish optik mikroskopning ruxsatini yaxshilashning keng tarqalgan usuliga aylandi. Odatda, past kattalashtirish ob'ektiv linzalari, masalan, 10X dan past, havo sifatida havodan foydalanadi, sinishi indeksi 1, ya'ni quruq ob'ektiv linzalari; suvga cho'mish muhiti distillangan suv bo'lib, uning sinishi ko'rsatkichi 1,33; yog'ga botirish ob'ektiv linzalari sadr yog'i yoki boshqa shaffof yog'dir va uning sinishi indeksi odatda 1,52 atrofida, Olympusning 100X moyli linzalari kabi linzalar va shisha slaydlarning sinishi ko'rsatkichiga yaqin. Suvga botirish maqsadlari va moyni botirish maqsadlari nafaqat yuqori kattalashtirishga ega, balki yuqori sinishi indeksli muhitdan foydalanish tufayli ob'ektivning aniqligini ham yaxshilaydi.
