Mikroskopning aniqligini qanday oshirish mumkin?
Sinovning asosiy vositalaridan biri mikroskop bo'lib, o'lchamlari asbobning ishlashini baholash uchun muhim ko'rsatkichdir. Ruxsat - bu yaqin masofada ikkita chiziq yoki kichik nuqta o'rtasida aniq farqlash qobiliyati. Ko'zning o'zi mikroskop vazifasini bajaradi. Inson ko'zining 25 sm deb qabul qilingan ko'rish masofasidagi o'lchamlari normal yorug'lik sharoitida 1/10 mm atrofida. To'g'ri chiziqlar bir qator nerv hujayralarini qo'zg'atishi mumkinligi sababli, ikkita to'g'ri chiziqni tomosha qilishda ko'zlarning o'lchamlari oshirilishi mumkin.
Inson ko'zining o'lchamlari atigi 1/10 mm bo'lganligi sababli, u bir-biridan 1/10 mm dan yaqinroq bo'lgan ikkita juda kichik ob'ektni ajrata olmaydi. Shunday qilib, mikroskopik tekshirish uchun optik mikroskopning rivojlanishi, keyin elektron mikroskopning rivojlanishi keldi. Namunada aniq ajratilishi mumkin bo'lgan ikkita kichik nuqta orasidagi eng qisqa masofa mikroskopning o'lchamlari deb ataladi. D=0.61/NA - uning hisoblash formulasi.
Tenglamada D um dagi rezolyutsiyani, yorug'lik manbasining to'lqin uzunligini um dagi va NA ob'ektiv linzaning raqamli diafragmani um (shuningdek diafragma nisbati deb ham ataladi) ifodalaydi.
Formula shuni ko'rsatadiki, mos keladigan ob'ektiv linzasining raqamli diafragma va tushayotgan yorug'lik manbasining to'lqin uzunligi mikroskopning o'lchamlarini aniqlaydi. Ko'rinib turibdiki, optik mikroskopni quyidagi yo'llar bilan yaxshilash mumkin:
1. Yorug'lik manbasining to'lqin uzunligini kamaytiring.
Ko'rinadigan yorug'lik qisqaroq to'lqin uzunligi 390nm. Bu ultrabinafsha nurning to'lqin uzunligi yorug'lik manbai sifatida foydalanilganda optik mikroskopning o'lchamlarini 0,2 um gacha pasaytirishi mumkin. Biroq, oddiy materiallar shishasining aksariyati to'lqin uzunligi 340 nm dan past bo'lgan juda ko'p yorug'likni o'zlashtiradi, bu ultrabinafsha nurlanishi sezilarli darajada zaiflashgandan keyin ham aniq va yorqin tasvirni yaratishni imkonsiz qiladi. yalang'och ko'z bilan va hatto kuzatilgan namunadan, mos ravishda 185nm va 200nm gacha ultrabinafsha nurlar orqali o'tishi mumkin bo'lgan kvarts va ftorit kabi qimmatbaho materiallardan foydalanish kerak. Mikroskopning ruxsatini oshirishning ushbu usuli o'z chegaralari tufayli tez-tez qo'llanilmaydi, bu esa mikroskopning yuqori narxi va cheklovlari bilan bog'liq.
2. Obyektiv linzaning NA raqamli diafragmasini oshiring.
Raqamli diafragma NA=n*sin(u)
Tenglamada n ob'ektiv linza va namuna o'rtasida joylashgan muhitning sindirish ko'rsatkichini va u ob'ektiv linzaning yarim diafragma burchagini bildiradi. Shu sababli, optik dizayn nuqtai nazaridan, kattaroq diafragma burchagini to'g'ri qabul qilish yoki sinishi indeksini oshirish optik mikroskopning o'lchamlarini oshirishning mashhur usuli sifatida paydo bo'ldi. Kattalashtirishga ega bo'lganlar kabi past kattalashtiruvchi ob'ektiv linzalar uchun vosita 10X dan past, odatda havo bo'lib, uning sinishi ko'rsatkichi 1 ga teng bo'lib, uni quruq muhitga aylantiradi. Suvga botirish uchun vosita distillangan suv bo'lib, uning sinishi ko'rsatkichi 1,33 ga teng. Olympusning 100X moyli linzalari kabi moyga botirish ob'ektiv linzalari uchun vosita odatda 1,52 atrofida bo'lgan sinishi indeksiga ega. Yuqori sinishi indeksli muhitdan foydalanish tufayli suvga cho'mdiruvchi ob'ektiv linzalari va moyga botirish ob'ektiv linzalari nafaqat yuqori kattalashtirishga ega, balki ob'ektiv linzalarning o'lchamlarini ham oshiradi.
