Flüoresan mikroskopiya lazerli konfokal mikroskopiyadan qanday farq qiladi
Floresan mikroskop
1, lyuminestsent mikroskop ultrabinafsha nurni yorug'lik manbai sifatida ishlatishdan iborat bo'lib, tekshiriladigan ob'ektni nurlantirish uchun ishlatiladi, shunda u floresans chiqaradi, so'ngra mikroskop ostida ob'ektning shakli va joylashishini kuzatadi. Floresan mikroskop hujayralardagi kimyoviy moddalarning so'rilishi, tashilishi, tarqalishi va joylashishini o'rganish uchun ishlatiladi. Hujayradagi ba'zi moddalar, masalan, xlorofill, ultrabinafsha nurlar bilan nurlanishdan keyin floresan bo'lishi mumkin; ba'zi moddalar borki, ular o'z-o'zidan lyuminestsent bo'lolmaydi, lekin lyuminestsent bo'yoqlar yoki lyuminestsent antikorlar bilan bo'yalgan bo'lsa, ular ultrabinafsha nurlar bilan nurlantirilgandan keyin ham lyuminestsatsiyalanishi mumkin va flüoresan mikroskopiya bu turdagi moddalarni sifatli va miqdoriy tadqiq qilish vositalaridan biridir.
2, floresan mikroskop printsipi:
(A) yorug'lik manbai: yorug'lik manbai turli to'lqin uzunlikdagi yorug'likni chiqaradi (ultrabinafshadan infraqizilgacha).
(B) qo'zg'alish filtri manbai: namuna orqali yorug'likning ma'lum bir to'lqin uzunligining floresansini ishlab chiqarishi mumkin, shu bilan birga flüoresans foydasiz yorug'likning qo'zg'alishini bloklaydi.
(C) Floresan namunasi: odatda ftorxrom bilan bo'yalgan.
(D) Bloklash filtrlari: floresansni tanlab o'tkazish uchun namuna tomonidan so'rilmaydigan qo'zg'atuvchi nurni to'sib qo'ying va floresansdagi ba'zi to'lqin uzunliklari ham tanlab uzatiladi. Nurlangan ob'ektni floresan qilish uchun yorug'lik manbai sifatida ultrabinafsha nurlardan foydalanadigan mikroskop. Elektron mikroskop birinchi marta 1931 yilda Berlinda, Germaniyada Norr va Haroska tomonidan yig'ilgan. Bu mikroskop yorug'lik nuri o'rniga yuqori tezlikdagi elektron nurdan foydalanadi. Elektron oqimining to'lqin uzunligi yorug'lik to'lqinidan ancha qisqa bo'lgani uchun elektron mikroskopning kattalashtirishi 8 00,000 martagacha, minimal chegaraning o'lchamlari 0,2 nanometrga teng bo'lishi mumkin. . 1963 yilda ob'ektning kichik tuzilishi yuzasida ko'rish mumkin bo'lgan skanerlash elektron mikroskopidan foydalanish boshlandi.
3, qo'llash doirasi: mayda narsalarning tasvirini kattalashtirish uchun ishlatiladi. Odatda biologiya, tibbiyot, mikroskopik zarralar va boshqa kuzatishlarda qo'llaniladi.
Konfokal mikroskop
1, yo'lda aks ettirilgan yorug'likdagi konfokal mikroskop va yarim aks ettiruvchi yarim linza, aks ettirilgan yorug'lik linzalari orqali boshqa yo'nalishlarda buklangan bo'ladi, uning fokusida pin teshigi bo'lgan to'siqda joylashgan, teshik joylashgan. fokus, to'siq orqasida fotoko'paytiruvchi trubka joylashgan. Tasavvur qilish mumkinki, detektor nurining fokus nuqtasidan oldin va keyin aks ettirilgan yorug'lik konfokal tizimning ushbu to'plami orqali kichik teshikka e'tibor qarata olmaydi, to'siq tomonidan bloklanadi. Shunday qilib, fotometr fokus nuqtasida aks ettirilgan yorug'likning intensivligini o'lchaydi.
2, printsip: an'anaviy optik mikroskop dala yorug'lik manbasidan foydalanadi, namunadagi har bir nuqtaning tasviri qo'shni nuqtalardan yorug'likning diffraktsiyasi yoki tarqalishi bilan aralashadi; lazerli skanerlash konfokal mikroskop namunadagi har bir nuqtani skanerlashning fokal tekisligida namunada nuqta yorug'lik manbasini hosil qilish uchun yorituvchi teshik orqali lazer nuridan foydalanadi, namuna nurlanadi, tasvirlashda pin teshigini aniqlashda. , fotoko'paytiruvchi trubadan (PMT) yoki sovuq elektrokuplaj moslamasidan (cCCD) keyin nuqta yoki nuqta yoki nuqta nuqtadan keyin pin teshigini aniqlash orqali yorug'lik intensivligi fotometr bilan o'lchanadi. cCCD) nuqtama-nuqta yoki chiziqma-satr qabul qiladi va kompyuter monitor ekranida tezda lyuminestsent tasvirni hosil qiladi. Yoritish teshigi va ob'ektiv linzaning fokus tekisligiga nisbatan aniqlash pin teshigi konjugat bo'lib, fokus tekisligidagi nuqta bir vaqtning o'zida yorug'lik teshigi va emissiya pin teshigiga qaratiladi, fokus tekisligidan tashqaridagi nuqta aniqlash pin teshigida bo'lmaydi. tasvirlash, shuning uchun konfokal tasvir oddiy mikroskoplarning loyqa tasvirlarining kamchiliklarini bartaraf etib, optik kesmaning namunasidir.
3, Qo'llash sohalari: tibbiyot, hayvonot va o'simliklarni tadqiq qilish, biokimyo, bakteriologiya, hujayra biologiyasi, to'qimalar embriologiyasi, oziq-ovqat fani, genetika, farmakologiya, fiziologiya, optika, patologiya, botanika, nevrologiya, dengiz biologiyasi, materialshunoslik, elektron fan, mexanika, neft geologiyasi, mineralogiyasi.
