Floresan mikroskopiya konfokal lazer mikroskopidan qanday farq qiladi
Floresan mikroskop
1. Flüoresan mikroskop ultrabinafsha nurlardan yorug'lik manbai sifatida tekshirilayotgan ob'ektni yoritib, u floresans chiqaradi, so'ngra mikroskop ostida ob'ektning shakli va joylashishini kuzatadi. Floresan mikroskopiya hujayra ichidagi moddalarning so'rilishi va tashilishi, shuningdek, kimyoviy moddalarning tarqalishi va joylashishini o'rganish uchun ishlatiladi. Hujayralardagi ba'zi moddalar, masalan, xlorofill, ultrabinafsha nurlar bilan nurlantirilgandan so'ng, floresan bo'lishi mumkin; ba'zi moddalarning o'zi floresan qila olmaydi, lekin ular floresan bo'yoqlar yoki lyuminestsent antikorlar bilan bo'yalgan bo'lsa, ular ultrabinafsha nurlar bilan nurlanishdan keyin floresan bo'lishi mumkin. Floresan mikroskopiyasi bunday moddalarni sifatli va miqdoriy tadqiq qilish vositalaridan biridir.
2. Flüoresan mikroskopning ishlash printsipi:
(A) Yorug'lik manbai: yorug'lik manbai turli to'lqin uzunlikdagi yorug'likni chiqaradi (ultrabinafshadan infraqizilgacha).
(B) Qo'zg'alish filtri yorug'lik manbai: floresansni rag'batlantirish uchun foydasiz bo'lgan yorug'likni blokirovka qilish bilan birga, namunaning lyuminestsatsiyasiga olib kelishi mumkin bo'lgan ma'lum bir to'lqin uzunligidagi yorug'likni uzatadi.
(C) Floresan namunalari: Odatda floresan pigmentlar bilan bo'yalgan.
(D) Bloklash filtri: namuna tomonidan so'rilmaydigan qo'zg'atuvchi yorug'likni bloklaydi va floresansni tanlab o'tkazadi. Floresansiyadagi ba'zi to'lqin uzunliklari ham tanlab uzatiladi. Yoritilgan ob'ektni lyuminestsatsiya qilish uchun yorug'lik manbai sifatida ultrabinafsha nurlardan foydalanadigan mikroskop. Elektron mikroskop birinchi marta 1931 yilda Berlinda (Germaniya) Norr va Hallowska tomonidan yig'ilgan. Bu mikroskop yorug'lik nuri o'rniga yuqori tezlikdagi elektron nurdan foydalanadi. Elektron oqimining toʻlqin uzunligi yorugʻlikdan ancha qisqa boʻlgani uchun elektron mikroskopning kattalashtirishi 800,000 martaga yetishi mumkin, minimal ruxsat chegarasi esa 0,2 nanometr. 1963 yilda qo'llanila boshlangan skanerlovchi elektron mikroskop odamlarga ob'ektlar yuzasidagi mayda tuzilmalarni ko'rish imkonini beradi.
3. Qo'llash sohasi: Kichik ob'ektlar tasvirlarini kattalashtirish uchun ishlatiladi. Odatda biologiya, tibbiyot, mikroskopik zarralar va boshqalarni kuzatishda qo'llaniladi.
konfokal mikroskop
1. Konfokal mikroskop aks ettirilgan yorug'likning optik yo'liga yarim aks ettiruvchi yarim linza qo'shib, linzadan o'tgan aks ettirilgan nurni boshqa yo'nalishlarga sindiradi. Fokusda pin teshigi bo'lgan to'siq mavjud va pin teshigi Fokus nuqtasida, to'siq orqasida, fotoko'paytiruvchi trubka joylashgan. Tasavvur qilish mumkinki, aniqlangan yorug'lik fokusidan oldin va keyin aks ettirilgan yorug'lik ushbu konfokal tizimdan o'tadi va kichik teshikka qaratilishi mumkin emas va to'siq tomonidan bloklanadi. Shunday qilib, fotometr o'lchaydigan narsa fokusda aks ettirilgan yorug'likning intensivligidir.
2. Printsip: An'anaviy optik mikroskoplar dala yorug'lik manbalaridan foydalanadi va namunadagi har bir nuqtaning tasviriga qo'shni nuqtalardan diffraktsiya yoki tarqoq yorug'lik xalaqit beradi; lazerli skanerlash konfokal mikroskoplari namunaning ichki qismini yoritish uchun yorituvchi teshiklar orqali nuqta yorug'lik manbalarini hosil qilish uchun lazer nurlaridan foydalanadi. Fokus tekisligining har bir nuqtasi skanerdan o'tkaziladi va namunadagi yoritilgan nuqta aniqlash teshigida tasvirlanadi, u aniqlanish orqasidagi fotoko'paytiruvchi trubka (PMT) yoki sovuq ulash moslamasi (cCCD) tomonidan nuqta yoki satr orqali qabul qilinadi. pinhole va tez kompyuter monitori ekranida lyuminestsent tasvir hosil bo'ladi. Yoritish teshigi va aniqlovchi pin teshigi ob'ektiv fokus tekisligiga nisbatan konjugatdir. Fokus tekisligidagi nuqtalar bir vaqtning o'zida yorug'lik teshigi va emissiya teshigiga qaratilgan. Fokus tekisligidan tashqaridagi nuqtalar aniqlash teshigida tasvirlanmaydi. Bu olinadi Konfokal tasvirlar namunalarning optik tasavvurlari bo'lib, oddiy mikroskoplarda loyqa tasvirlarning kamchiliklarini bartaraf etadi.
3. Qo'llash sohalari: tibbiyot, hayvonot va o'simliklar ilmiy tadqiqotlari, biokimyo, bakteriologiya, hujayra biologiyasi, to'qimalar embriologiyasi, oziq-ovqat fani, genetika, farmakologiya, fiziologiya, optika, patologiya, botanika, nevrologiya, dengiz biologiyasi va materialshunoslik, elektron fan , mexanika, neft geologiyasi, mineralogiya.
