Lazerli skanerlash multifoton mikroskopining afzalliklarini oshirish
Lazerli skanerlash multifotonli mikroskopiya optik mikroskopga nisbatan katta yaxshilanishdir. U tirik hujayralar, sobit hujayralar va to'qimalarning chuqur tuzilishini kuzatishi va aniq va aniq ko'p qatlamli Z-tekis tuzilmalarni, ya'ni optik qismlarni olishi mumkin, ulardan namunaning uch o'lchovli qattiq tuzilishini qurish mumkin. Konfokal mikroskop lazerli yorug'lik manbasidan foydalanadi, u kengaygandan so'ng, ob'ektiv linzaning butun orqa fokus tekisligini to'ldiradi va keyin ob'ektiv linzalarning linzalari tizimidan o'tib, namunaning fokus tekisligida juda kichik nuqtaga yaqinlashadi. Ob'ektivning raqamli diafragmasiga qarab, eng yorqin yorug'lik nuqtasining diametri taxminan 0,25 ~ 0,8 mkm, chuqurligi esa taxminan 0,5 ~ 1,5 mkm. . Konfokal nuqtaning o'lchami mikroskop dizayniga, lazer to'lqin uzunligiga, ob'ektiv ob'ektiv xususiyatlariga, skanerlash birligi holati sozlamalariga va namunaning xususiyatlariga bog'liq. Dala mikroskopiyasi katta yoritish diapazoni va chuqurligiga ega, konfokal mikroskop esa fokus tekisligidagi fokus nuqtasiga yo'naltirilgan yorug'likka ega. Konfokal mikroskopiyaning eng asosiy afzalligi shundaki, u qalin lyuminestsent namunalarni (50 mkm yoki undan koʻproqqa yetishi mumkin) nozik optik kesimini amalga oshirishi mumkin va boʻlaklarning qalinligi 0,5 dan 1,5 mkm gacha. Mikroskopning Z o'qi step motori yordamida namunani yuqoriga va pastga siljitish orqali bir qator optik kesma tasvirlarini olish mumkin. Tasvir ma'lumotlarini olish tekislik ichida boshqariladi va namunadagi boshqa joylardan chiqadigan signallarga xalaqit bermaydi. Fon floresansining ta'sirini olib tashlaganingizdan va signal-shovqin nisbatini oshirgandan so'ng, konfokal tasvirlarning kontrasti va o'lchamlari an'anaviy dala yoritilgan floresan tasvirlarga nisbatan sezilarli darajada yaxshilanadi. Ko'pgina namunalarda ko'plab murakkab strukturaviy komponentlar murakkab tizimlarni hosil qilish uchun bir-biriga bog'langan, ammo etarli optik qismlar to'plangandan so'ng, biz ularni dasturiy ta'minot orqali uch o'lchamda qayta qurishimiz mumkin. Ushbu eksperimental usul biologik tadqiqotlarda hujayralar yoki to'qimalar o'rtasidagi murakkab strukturaviy va funktsional munosabatlarni yoritishda keng qo'llaniladi.
