Floresan mikroskop va oddiy optik mikroskop o'rtasidagi farq
Floresan mikroskop va oddiy optik mikroskop farqi, floresan mikroskop va oddiy optik mikroskop farq qiladi, bu namunani kuzatish uchun oddiy yorug'lik manbasini yoritish orqali emas, balki ma'lum bir to'lqin uzunligidagi yorug'likdan foydalanish (odatda ultrabinafsha, ko'k-binafsha) lyuminestsent material ichida mikroskop ostida namunani qo'zg'atish, u floresan yorug'lik chiqaradi, shuning uchun floresan mikroskopning yorug'lik manbaidagi roli to'g'ridan-to'g'ri yorug'lik emas, balki ichki yorug'lik floresansining namunalarini rag'batlantirishning bir turi sifatida. floresan mikroskopning manbai to'g'ridan-to'g'ri yorug'lik emas, balki namuna ichidagi floresan moddani rag'batlantirish uchun energiya manbai sifatida. Namunani kuzatishimiz mumkin bo'lgan sabab yorug'lik manbasining yoritilishi bilan bog'liq emas, balki qo'zg'atilgan yorug'lik energiyasini o'zlashtirgandan so'ng namunadagi lyuminestsent moddasi tomonidan taqdim etilgan flüoresan hodisasidir. Ko'rinib turibdiki, lyuminestsent mikroskopning xarakteristikalari, asosan, uning yorug'lik manbai ko'p miqdordagi o'ziga xos to'lqin uzunlikdagi qo'zg'atuvchi yorug'lik diapazonini ta'minlashi mumkin, shuning uchun tekshirilayotgan namunadagi lyuminestsent moddalar qo'zg'alish nurining zarur intensivligini olishi mumkin. Shu bilan birga, floresan mikroskopda mos keladigan filtr tizimi bo'lishi kerak. Floresan mikroskop **fluoresans gistokimyosi uchun asosiy vositadir. U ultra yuqori bosimli yorug'lik manbai, filtr tizimi (shu jumladan qo'zg'atish va bostirish filtri plitasi), optik tizim va fotografik tizim va boshqa asosiy komponentlardan iborat bo'lib, namunani floresan chiqarishni rag'batlantirish uchun yorug'likning ma'lum bir to'lqin uzunligidan foydalanish hisoblanadi.
1. floresan qo'zg'alish usuli: yorug'likning to'lqin uzunligi diapazoniga ko'ra, UV qo'zg'atish usuli (ultrabinafsha yorug'lik yordamida) va BV qo'zg'alish usuli (ko'k binafsha nur yordamida) ikki turdagi UV qo'zg'alish usuli ultrabinafsha nurlar uchun 400 nm dan qisqaroq. qo'zg'alish. Ushbu usulda ko'rinadigan qo'zg'atuvchi yorug'lik yo'q, shuning uchun kuzatilgan floresans bo'yoqning o'ziga xos floresansini ko'rsatadi va namunadagi o'ziga xos flüoresansni fon to'qimalarining o'z-o'zidan floresansidan ajratish oson.
2. BV qo'zg'atish usuli: Usul qo'zg'atish uchun ultrabinafshadan ko'k nurgacha 404nm, 434nm markazida joylashgan. Ushbu usul namunani nurlantirish uchun ko'k chiroqdan foydalanadi, shuning uchun lyuminestsent kuzatuv tizimining kesish filtri ko'k chiroqni butunlay to'sib qo'yadigan va kerakli yashil va sariq floresansni to'liq o'tkaza oladigan filtrdan foydalanishi kerak. Floresan antikor usuli uchun floresan pigmentlar. Qo'zg'atuvchi yorug'likning maksimal yutilishining to'lqin uzunligi va floresansning maksimal emissiyasining to'lqin uzunligi bir-biriga yaqin bo'lganligi sababli, BV qo'zg'alish usulida ishlatiladigan filtrlar keskin kesilgan filtrlar bo'lishi kerak. Bu usul qo'zg'atuvchi yorug'lik sifatida ko'k nurdan foydalanadi, shuning uchun ftoroxromning yutilish samaradorligi yuqoriroq va yorqinroq tasvirni olish mumkin. Kamchilik shundaki, 500 nm dan past floresans ko'rinmaydi va 500 nm dan yuqorida butun tasvir sariq rangda ko'rinadi. Floresan antikor usulida o'ziga xoslikning aksariyati ftoroxromga xos rang bilan baholanadi, shuning uchun yuqorida tavsiflangan BV qo'zg'atish usulining kamchiliklari nozik o'ziga xoslikni muhokama qilishda juda ta'sirli bo'ladi.
