Konfokal mikroskop va oddiy optik mikroskopni solishtirish
Mikroskop hujayralarni kuzatish uchun asosiy vositadir. Yorug'lik manbasiga qarab, uni ikki toifaga bo'lish mumkin: optik mikroskop va elektron mikroskop. Birinchisi yorug'lik manbai sifatida ko'rinadigan yorug'likdan (ultrabinafsha mikroskopdan ultrabinafsha nurgacha) foydalansa, ikkinchisi yorug'lik manbai sifatida elektron nurdan foydalanadi. Oddiy optik mikroskop va lazer konfokal mikroskop bir xil optik mikroskopga tegishli.
I. Umumiy optik mikroskop
Oddiy biologik mikroskop uch qismdan iborat, xususan: ① yorug'lik manbai va kondensatorni o'z ichiga olgan yoritish tizimi; ② ob'ektiv va ko'zoynaklardan tashkil topgan optik kattalashtirish tizimi mikroskopning asosiy qismi bo'lib, sharsimon aberatsiya va xromatik aberatsiyani bartaraf etish uchun ko'zoynaklar va ob'ektivlar murakkab linzalar guruhidan iborat; ③ mexanik qurilma, materialni tuzatish va qulaylikni kuzatish uchun ishlatiladi.
Mikroskop ob'ekti nafaqat kattalashtirish bilan, balki mikroskopning o'lchamlari (rezolyutsiyasi) bilan ham aniq bo'ladi, aniqlash quvvati mikroskopga (yoki inson ko'zining nishondan 25 sm gacha) tegishli bo'lib, ob'ektni zui kichik intervallarni ajratish qobiliyatiga ega. ajratish kuchi yorug'likning to'lqin uzunligi va oyna og'iz tezligi va muhitning sinishi indeksi bilan belgilanadi, formulada ifodalanadi:
R=0.61l /NANA=nsin /2 bunda: n=muhitning sindirish ko'rsatkichi;=oyna og'iz burchagi (kuchlanish burchagi ob'ektiv linza og'ziga namuna), NA=oyna og'iz tezligi (raqamli diafragma). Oynaning og'zining burchagi har doim 180? dan kichik bo'lishi kerak, shuning uchun sina/2 ning zui qiymati 1 dan kichik bo'lishi kerak.
Optik linzalarni ishlab chiqarishda ishlatiladigan shishaning sinishi ko'rsatkichi 1,65 ~ 1,78 ni tashkil qiladi, ishlatiladigan muhitning sinishi ko'rsatkichi shishaga qanchalik yaqin bo'lsa, shuncha yaxshi bo'ladi. Quruq ob'ektiv ob'ektiv uchun havo uchun vosita, ko'zgu og'iz tezligi odatda 0.05 ~ 0,95; vosita sifatida sadr yog'i bilan yog 'linzalari, oyna og'iz tezligi 1,5 ga yaqin bo'lishi mumkin.
Oddiy yorug'lik to'lqin uzunligi 4 00 ~ 700nm, shuning uchun mikroskopni hal qilish quvvati qiymati 0,2 mm dan kam bo'lmaydi, inson ko'zining hal qilish kuchi 0,2 mm, shuning uchun mikroskopning umumiy dizayni zui kattalashtirish odatda 1000X.
Ikkinchidan, lazerli konfokal skanerlash mikroskopi
Lazerli konfokal skanerlash mikroskopi (lazerli konfokal skanerlash mikroskopi), skanerlash yorug'lik manbai sifatida lazer bilan, nuqtadan nuqtaga, chiziqdan chiziqqa, sirt bo'yicha tezkor skanerlash tasviri, skanerlash lazeri va floresan to'plamining umumiy ob'ektiv, ob'ektiv skanerlash lazeri fokuslash nuqtasi , balki ob'ekt nuqtasini bir zumda tasvirlash. Lazer nurining qisqaroq to'lqin uzunligi tufayli nur juda nozik, shuning uchun konfokal lazerli skanerlash mikroskoplari oddiy optik mikroskopdan taxminan 3 baravar yuqori aniqlikka ega. Tizim bir marta fokuslanadi va skanerlash namunaning bir tekisligi bilan chegaralanadi. Fokuslash chuqurligi bir xil bo'lmaganda, namunaning turli xil chuqurlik darajalarining tasvirlarini olish mumkin va bu tasvir ma'lumotlari kompyuterda saqlanadi, kompyuter tahlili va simulyatsiya orqali hujayra namunasining uch o'lchovli tuzilishini ko'rsatishi mumkin. .
