Multifotonli lazerli skanerlash mikroskopining (MLSM) afzalliklari va kamchiliklari
Multifotonli lazerli skanerlash mikroskopiyasi lazerli skanerlash mikroskopiyasi texnologiyasiga asoslangan eksperimental usul bo'lib, uch o'lchamli kuzatish uchun yaxshiroq optik kesish imkoniyatlarini ta'minlaydi. Ko'p fotonli floresan qo'zg'atish usuli namunalarning yuqori aniqlikdagi floresan tasvirlarini to'plash uchun uzoq to'lqinli qizil yorug'lik yoki yaqin infraqizil nurlardan foydalanadi, bu tirik namunalarga minimal zarar etkazadi. Shuning uchun, u jonli hujayra ko'rish uchun javob beradi, ayniqsa miya bo'laklari, embrionlar kabi qalin tirik to'qimalar, va hokazo. Butun organlar yoki hatto butun tanalarni tasvirlash tadqiqotlari.
Afzalliklar quyidagilardan iborat:
1. Qizil nur yoki infraqizil nurni qo'zg'atish uchun foydalaning va yorug'lik tarqalishi kichik (kichik zarrachalarning tarqalishi to'lqin uzunligining to'rtinchi kuchiga teskari proportsionaldir).
2. Hech qanday teshik kerak emas va tasvirlash kesimidan ko'proq tarqoq fotonlarni yig'ish mumkin.
3. Pin teshigi fokuslangan maydon yoki fokus maydonidan chiqarilgan tarqoq fotonlarni ajrata olmaydi va chuqur qatlamlarda ko'p fotonli tasvirning signal-shovqin nisbati yaxshi.
4. Bir fotonli qo'zg'alish uchun ishlatiladigan ultrabinafsha yoki ko'rinadigan yorug'lik nurning fokus tekisligiga etib borishidan oldin namuna tomonidan osongina so'riladi va zaiflashadi va chuqur qatlamlarni qo'zg'atish qiyin.
5. Biologik mikroskopni kuzatish nuqtai nazaridan, birinchi navbatda, organizmning faol holatiga zarar bermaslik va suv oqimini, ion konsentratsiyasini, kislorod va ozuqa moddalarini ushlab turish kerak. Yorug'likni kuzatishda issiqlik va foton energiyasi ham nurlanish miqdori va hujayralar zarar ko'rmaydigan yorug'lik energiyasi ichida qolishi kerak.
6. Multifotonli mikroskopiya ham juda ko'p afzalliklarga ega. Misol uchun, uch o'lchamli ruxsat, chuqurlik kirib borishi, tarqalish samaradorligi, fon yorug'ligi, signal-shovqin nisbati, nazorat qilish va boshqalar nuqtai nazaridan, oldingi lazer mikroskoplarida mavjud bo'lmagan yoki mos kela olmaydigan transsendent xususiyatlar mavjud.
Ko'p fotonli konfokal lazerli skanerlash mikroskopiyasi turli tadqiqot va qo'llash sohalariga kengaytirildi. U namunalarni tabiiy holatida uch o'lchovli buzilmaydigan kuzatishni o'tkazishi va tizimning ruxsati va signal-shovqin nisbatini yaxshilashi mumkin. Ko'p fotonli qo'zg'atuvchi materiallardan foydalanish Xususiyatlardagi o'zgarishlar, shuningdek, yuqori qo'llash qiymatiga ega bo'lgan har qanday yo'nalishda uch o'lchovli balandlik ma'lumotlarini saqlash va uch o'lchovli mikro ishlov berishni amalga oshirishi mumkin. Ko'p fotonli konfokal mikroskopiya bilan bog'liq bo'lgan mashinalar, materiallar, lazer texnologiyasi va boshqalarning yanada rivojlanishi bilan ko'proq Fotonik konfokal lazerli skanerlash mikroskopiyasi yanada kengroq rivojlanish va kengroq qo'llanilishiga ega bo'ladi, deb ishoniladi.
Kamchiliklari quyidagilardan iborat:
1. U faqat floresansni tasvirlashi mumkin.
2. Agar namunada pigmentlar kabi qo'zg'atuvchi nurni yutadigan xromoforlar mavjud bo'lsa, namuna issiqlik ta'sirida shikastlanishi mumkin.
3. Ruxsat bir oz kamayadi. Bir vaqtning o'zida konfokal teshiklardan foydalanish orqali uni yaxshilash mumkin bo'lsa-da, signal yo'qoladi.
4. Qimmatbaho ultrafast lazerlar bilan cheklangan, multifotonli skanerlash mikroskoplarining narxi nisbatan yuqori.
