Yorug'lik mikroskopining tasviriy optik yo'l tizimini sozlash va mikroskopik tekshirish konturi
Tasvirlash optik yo'l tizimini sozlash va mikroskopik tekshirish sxemasi
Mikroskopning tasvirlash optik tizimini sozlash turli mikroskopiya texnikasi ehtiyojlariga qarab amalga oshiriladi. Qisqacha aytganda, mikroskop deb ataladigan narsa, mikroskop orqali namunani kuzatishda ishlatiladigan yoritish usuli va namuna hosil qilgan tasvirda yaxshiroq kontrastni olish texnikasi va usuli. Quyida mikroskopning bir necha usullarda etukligi va tegishli mikroskopni ko'rish optik tizimini sozlash usuli qisqacha tasvirlangan.
1. Transmissiya yorqin maydoni:
Bu mikroskop ixtiro qilinganidan beri eng an'anaviy va keng tarqalgan qo'llash usuli. Asosiy komponentlar: a. Ob'ektiv ob'ektiv: yorqin maydonni kuzatish uchun har qanday ob'ektiv linzalardan foydalanish mumkin; b. Spotting diafragma: barcha turdagi skoplardan foydalanish mumkin, afzalroq diafragma bilan jihozlangan. Sozlash usuli: Yuqoridagi mikroskopning Kuhler yoritish tizimi sozlangandan so'ng, yorqin maydon usuli qo'llanilishi mumkin. Qo'llash doirasi: to'qimalarning bo'yalgan barcha qismlari, qon surtmalari va boshqalar. Ehtiyot choralari: a. Kuzatuvning yorqin maydon usulidan foydalanganda Kuhler yoritish tizimini sozlash kerak; b. Ko'rish maydonining diafragmasi o'zboshimchalik bilan ochilmasligi kerak va kondensator oynasining oldingi linzalari 10 ×, 10 × dan kichik va 10 dan ortiq ob'ektiv linzalardan foydalanganda mos ravishda optik yo'lga va tashqariga joylashtirilishi kerak. ×; c. Kondensator oynasining diafragma diafragmasi ko'rish maydonining yorqinligini sozlash uchun ishlatilmasligi kerak va kondensator oynasining balandligi beg'araz sozlanmasligi kerak, yoki mikroskopning o'lchamlari pasayadi va bo'yalgan to'qimalarning o'lchamlari pasayadi. shikastlanadi. mikroskopning o'lchamlari va shikastlanishi Kuhler yoritish tizimiga moslashtirildi; d. mikrografiklar uchun ob'ektiv linzalarini kattalashtirishdan foydalanishdagi har bir o'zgarishda siz kondensator linzalarining diafragma diafragmasini sozlashingiz kerak, shunda uning o'lchami 2/3 ob'ektiv linzalarida ishlatiladigan raqamli diafragmaga to'liq teng bo'ladi.
2. O'tkazilgan yorug'lik fazasining kontrasti usuli:
Bu kontrastni kuchaytirish usulining zamonaviy mikroskop tekshiruvidir. Asosiy komponentlar: fazali kontrastli ob'ektiv linzalar, yorqin ko'rish maydoni va fazali kontrastli ko'p maqsadli aniqlash doirasi, fokuslash teleskopi, yashil filtrlar.
Sozlash usullari:
a. Kuhler yoritish tizimini sozlash asosida yorqin maydon usuli yordamida namunani aniq yo'naltiring
b. Terish shkalasi holatini tekislash uchun aniqlash doirasini Ph1 ga aylantiring, 10 × fazali kontrastli ob'ektivni tanlang va kuzatilishi kerak bo'lgan shaffof namunani almashtiring.
c. Ko'zoynaklardan birini ajratib oling, uni markazlashtirilgan teleskop bilan almashtiring va ko'rish sohasidagi ikki fazali kontrastli halqalarga (ob'ektiv linzaning qora fazali kontrastli halqasi va kondensator linzasining yorug'lik o'tkazuvchanlik fazasi kontrastli halqasi) e'tibor bering.
d. Ko'rish sohasidagi ikki fazali kontrastli halqalar bir-biriga mos kelmasligi mumkin, ikkita sozlash moslamasini aniqlash doirasi bo'yicha sozlang (fazali kontrastli halqani sozlash dastagining chap va o'ng holatini sozlash va ishqalanish tugmachasining old va orqa holatini sozlash) , shunday qilib, old va orqa uchun yorug'lik uzatish halqasi o'ngga va chapga qora halqa bilan mos keladi
e. Moslashtirgandan so'ng, kuzatish uchun okulyarga qayting va namunaning fazali kontrastli tasvirini kuzatish uchun yashil filtrni optik yo'lga bosing.
f. Kuzatish uchun 20 × va 40 × ob'ektiv linzalari mavjud bo'lganda, aniqlovchi linzalar Ph2 holatiga o'rnatilishi kerak va 100 ta ob'ektiv linzalardan foydalanilganda, aniqlovchi linzalar Ph3 holatiga o'rnatilishi kerak.
Qo'llash doirasi: Shaffof, bo'yalmagan yoki bo'yab bo'lmaydigan namunalarni, masalan, barcha turdagi hujayralar, tirik to'qimalar, bo'yalmagan yoki bo'yalmagan to'qimalar bo'limlari, suv organizmlari va boshqalarni kuzatish uchun javob beradi.
3. Differensial interferensiya fazasining kontrasti usuli:
Halo bilan birga tasvir atrofida namuna detallarini kuzatishning fazali kontrast usulini engib o'tish uchun ko'rish kerak bo'lgan tafsilotlarni yashiradi, shuningdek namunalar yoki to'qimalarning bo'limlari ancha nozik qalinlikni talab qiladi, printsipial ravishda, mumkin. 10?m dan qalinroq bo'lishi va boshqa cheklovlar, sub-differensial shovqin fazasi kontrast usulini loyihalash uchun ikki nurli shovqin tamoyilidan foydalanish.
Sozlash usullari:
a. DIC usuli Kulemin tizimi allaqachon sozlanganligi asosida sozlanishi kerak
b. 10 × ob'ektiv linzadan foydalanib, yorqin ko'rish maydoni bilan namunani aniq ko'ra oladigan ob'ektiv linzaning fokuslanish holatini aniqlang.
c. Polarizatorni yorug'lik yo'liga joylashtiring va u sharq-g'arbiy yo'nalishda yo'naltirilishi kerakligini unutmang.
d. Kondensatorni 10 × ob'ektiv ob'ektivdan foydalanishga mos keladigan holatga aylantiring, ya'ni DIC 0.3-0.4.
e. 10 × ob'ektiv linzalari uchun DIC slayderini ob'ektivning orqa tomoniga yoki ob'ektiv konvertoriga joylashtiring.
f. Analizatorni tasvirlash optik yo'liga joylashtiring va uning yo'nalishi janubdan shimolga bo'lishi kerakligini unutmang.
g. Kuzatish kerak bo'lgan shaffof namunani almashtiring, namunani aniq yo'naltirish uchun yorug'lik manbasini yoqing.
h. Differensial interferentsiya kontrastli tasvirni eng yaxshi effektga, ya'ni eng aniq yengillik effektiga erishish uchun DIC qo'shimchasini sozlang.
i. Shu bilan birga, kondensator oynasining diafragma diafragmasini sozlang, shunda kontrastning ta'siri ham optimal bo'ladi.
j. Keyin namunaning tuzilishini turli darajalarda ko'rish uchun namunaning tafsilotlarini sozlang.
k. Agar qo'shimcha rang (birinchi tartibdagi qizil kechikish plitasi) qo'yilsa va DIC qo'shimchasi bir vaqtning o'zida sozlansa, qizil, to'q sariq, sariq, yashil, ko'k, ko'rish maydonida doimiy o'zgaruvchan yorqin ranglar ko'rinadi. binafsha, pushti, pushti-binafsha va oltin-sariq. Qo'llash doirasi: shaffof yoki bo'yalmaydigan to'qimalar bo'limlari, qalinligi taxminan 100?m gacha, tirik to'qimalar va madaniyatdagi tirik hujayralar, kichik tirik organizmlar va boshqalar.
