Lazerli konfokal mikroskopning ishlash printsipi
Lazerli konfokal mikroskopning ishlash printsipi
Olympus lazerli konfokal mikroskopi signallarni qabul qila oladigan detektordir. Uning ishlash printsipi shundan iboratki, nuqta yorug'lik manbai floresan mikroskopdan o'tgandan so'ng "Havoli disk" deb nomlangan kattalashtirilgan nuqta sifatida tasvirlanadi. Oddiy oq nurli interferometrik konfokal mikroskopda fokus tekisligidan tashqarida chiqarilgan yorug'lik teshik bilan bloklanadi, uning o'lchami Airy diskining qancha qismi detektorga kirishini aniqlaydi. Pin teshigi qanchalik kichik bo'lsa, natijada tasvir aniqroq bo'ladi va yorug'likning katta qismi yo'qolganligi sababli tasvirni xiralashtiradi. Diafragma teshigi qanchalik kichik bo'lsa, aniqlik shunchalik yaxshi bo'ladi, lekin yana yorug'lik signali yo'qoladi. Olympus lazerli konfokal mikroskop bir vaqtning o'zida rangli CCD tasvirni va lazerli skanerlash konfokal tasvirni taqdim etishi mumkin. Olympus konfokal lazer mikroskoplari bitta yorug'lik manbai, bitta namuna va bitta detektorning konfokal o'rnatilishi orqali balandlikni o'lchashga qodir. Namuna ob'ektiv linzaning fokus tekisligida joylashganida va namuna yuzasidan aks ettirilgan lazer nuri konfokal diafragmaga yo'naltirilganda, fotodetektor namunadan signal oladi. Namuna fokusdan tashqari holatda bo'lsa, konfokal diafragma lazer signalini qabul qilmaydi, shuning uchun faqat in-fokus signali yig'iladi. Bu xususiyat Olympus lazerli konfokal mikroskopning optik kesish funksiyasini amalga oshirishi mumkin.
Konfokal lazer mikroskopining afzalliklari
1. Yorug'lik manbai sifatida lazer nuridan foydalanib, mos keladigan lyuminestsent problar belgilanganidan so'ng, namuna ikki o'lchovli optik tasavvurlar qatlam qatlamini olish uchun nuqta nuqta skanerdan o'tkaziladi. U "hujayra KT" funktsiyasiga ega va uch o'lchamli tasvirlarni olish uchun kompyuterning uch o'lchovli rekonstruksiya dasturi tomonidan qo'llab-quvvatlanishi mumkin, bu hujayralar va to'qimalarning uch o'lchovli shakli va fazoviy munosabatlarini kuzatish uchun har qanday burchak ostida aylantirilishi mumkin;
2. Tirik hujayralar va to'qimalarni shikastlanmasdan kuzatishi va hujayralardagi Ca ioni kontsentratsiyasi va pH qiymati kabi tirik hujayralarning fiziologik ma'lumotlarini dinamik ravishda o'lchashi mumkin;
3. U hujayra membranasining suyuqligini, hujayralararo aloqani, hujayra sintezini, sitoskeleton elastikligini va boshqalarni o'lchashi mumkin va hujayra ichidagi "jarrohlik" ni bajarish uchun "engil pichoq" sifatida ishlatilishi mumkin. Ushbu texnologiya tirik hujayralar va to'qimalarni in situ dinamik va miqdoriy kuzatish va o'lchash imkonini beradi.
