Mikroskopimning aniqligini yaxshilash uchun nima qilishim mumkin?
Mikroskop sinov uskunalari uchun asosiy jihozlardan biri bo'lib, mikroskopning ishlashini baholash uchun muhim ko'rsatkich bu o'lchamlari. Ruxsat ikki kichik nuqtani yoki ikkita chiziq orasidagi kichikroq masofani aniq ajratish qobiliyatini anglatadi. Inson ko'zining o'zi mikroskop bo'lib, standart yorug'lik sharoitida inson ko'zi vizual masofada (xalqaro 25 sm deb tan olingan) o'lchamlari bo'yicha taxminan 1/10 mm ga teng. ikkita to'g'ri chiziqni kuzatish uchun bir qator to'g'ri chiziqlar tufayli bir qator nerv hujayralarini qo'zg'atishi mumkin, ko'zning o'lchamlari biroz oshishi mumkin.
Inson ko'zining o'lchamlari atigi 1/10 mm, shuning uchun 1/10 mm dan kichikroq yoki 1/10 mm dan yaqinroq bo'lgan ikkita kichik ob'ekt orasidagi masofani inson ko'zi ajrata olmaydi. Shuning uchun oddiy so'l lupadan optik mikroskopning mikroskopik kuzatuvigacha, keyin esa elektron mikroskop. Mikroskopning ruxsati namunada aniq ajratilishi mumkin bo'lgan ikkita kichik nuqta orasidagi kichikroq masofa sifatida aniqlanadi. Uning hisoblash formulasi: D=0.61l / NA
Bu erda: rezolyutsiya uchun D (um); l yorug'lik manbasining to'lqin uzunligi uchun (um); Ob'ektiv linzaning raqamli kalibri uchun NA (oyna og'zining tezligi deb ham ataladi).
Formuladan olinishi mumkin bo'lgan mikroskopning o'lchamlari tushayotgan yorug'lik manbasining to'lqin uzunligi va mos keladigan ob'ektiv linzalarning raqamli diafragma bilan aniqlanadi. Ko'rinib turibdiki, optik mikroskopni takomillashtirish usuli:
1, yorug'lik manbasining to'lqin uzunligini kamaytiring.
Ko'rinadigan yorug'lik qisqa to'lqin uzunligi 390nm, agar yorug'lik manbai sifatida ultrabinafsha nurlar to'lqin uzunligi bo'lsa, optik mikroskopning o'lchamlari 0,2 um gacha kamayishi mumkin. Lekin eng keng tarqalgan materiallar, shisha yorug'lik ostida 340nm to'lqin uzunlikdagi ko'p sonli yutadi, chunki, ultrabinafsha nurlar ko'p susaytirishi orqali aniq, yorqin tasvir hosil keyin hosil bo'lishi mumkin emas. Shuning uchun biz kvartsdan (200 nm gacha ultrabinafsha nurlarni uzatadi), lyuminestsent toshdan (185 nm gacha ultrabinafsha nurlarni o'tkazadi) va boshqa qimmatbaho materiallardan foydalanishimiz kerak, ultrabinafsha mikroskopiyani yalang'och ko'z bilan kuzatish mumkin emas va hatto unga ta'sir qiladi. Kuzatilgan namunalarning cheklovlari qimmat narx bilan birlashtirilgan, shuning uchun mikroskopning o'lchamlarini yaxshilashning bu usuli o'zining cheklovlari tufayli keng qo'llanilmaydi.
2, ob'ektiv linzaning raqamli diafragma NA ni oshiring.
Raqamli diafragma NA=n*sin(u)
Bu erda n - ob'ektiv linza va namuna orasidagi muhitning sinishi ko'rsatkichi; u - ob'ektiv linzaning yarim diafragma burchagi. Shu sababli, optik dizayndan kattaroq diafragma burchagidan to'g'ri foydalanish yoki sinishi indeksini oshirish optik mikroskopning o'lchamlarini yaxshilash uchun keng tarqalgan. Umumiy past kattalashtirish ob'ektivi, masalan, havo yordamida muhitdan 10X past, sinishi ko'rsatkichi 1, ya'ni quruq tizim ob'ektivi; suvga cho'mish muhiti distillangan suvdir, uning sindirish ko'rsatkichi 1,33; yog'ga botiriladigan ob'ektiv muhit sadr yog'i yoki boshqa shaffof moy bo'lib, uning sinishi indeksi odatda 1,52 ga yaqin, linza va slaydning sinishi ko'rsatkichiga yaqin, masalan, Olympusning 100X moy oynasi. Suvga botirish maqsadlari va moyga botirish maqsadlari nafaqat yuqori kattalashtirishga ega, balki yuqori sinishi indeksli muhitdan foydalanish tufayli ob'ektivning aniqligini ham yaxshilaydi.
