Flüoresan mikroskopiya va lazerli konfokal mikroskopiya tamoyillari
floresan mikroskop
1. Flüoresan mikroskop - ultrabinafsha nurlardan yorug'lik manbai sifatida sinovdan o'tayotgan ob'ektni yoritib, flüoresan nurlanishni keltirib chiqaradigan, so'ngra mikroskop ostida ob'ektning shakli va joylashishini kuzatuvchi qurilma. Floresan mikroskopiya hujayra ichidagi moddalarning so'rilishi, tashilishi, tarqalishi va lokalizatsiyasini o'rganish uchun ishlatiladi. Hujayralardagi ba'zi moddalar, masalan, xlorofill, ultrabinafsha nurlanish ta'siridan keyin flüoresansni chiqarishi mumkin; Ba'zi moddalarning o'zi lyuminestsensiyani chiqara olmasa ham, ular floresan bo'yoqlar yoki lyuminestsent antikorlar bilan bo'yalgan va ultrabinafsha nurlar bilan nurlantirilgandan keyin ham flüoresans chiqarishi mumkin. Floresan mikroskopiya bu moddalarni sifatli va miqdoriy tadqiq qilish vositalaridan biridir.
2. Flüoresan mikroskopning ishlash printsipi:
(A) Yorug'lik manbai: yorug'lik manbai turli to'lqin uzunlikdagi yorug'lik chiqaradi (ultrabinafshadan infraqizilgacha).
(B) Qo'zg'atuvchi filtr yorug'lik manbai: qo'zg'atuvchi floresans uchun foydasiz bo'lgan yorug'likni blokirovka qilish bilan birga, namunada floresans hosil qilishi mumkin bo'lgan ma'lum bir to'lqin uzunligidagi yorug'likni o'tkazish.
(C) Floresan namunasi: Odatda lyuminestsent pigment bilan bo'yalgan.
(D) Bloklash filtri: namuna tomonidan so'rilmagan qo'zg'alishni blokirovka qilish orqali floresansni tanlab uzatadi va ba'zi to'lqin uzunliklari ham floresansda tanlab uzatiladi. Nurlangan jismlardan flüoresansni chiqarish uchun yorug'lik manbai sifatida ultrabinafsha nurlardan foydalanadigan mikroskop. Elektron mikroskop birinchi marta 1931 yilda Germaniyaning Berlin shahrida Norr va Xarroska tomonidan yig'ilgan. Ushbu turdagi mikroskop yorug'lik nurlari o'rniga yuqori tezlikdagi elektron nurlardan foydalanadi. Elektron oqimining to'lqin uzunligi yorug'lik to'lqinlariga nisbatan ancha qisqa bo'lganligi sababli, elektron mikroskopning kattalashtirishi minimal ruxsat chegarasi 0,2 nanometr bo'lgan 800000 martaga yetishi mumkin. Uni 1963-yilda qo‘llashni boshlagan skanerlovchi elektron mikroskop odamlarga jismlar yuzasidagi mayda tuzilmalarni ko‘rish imkonini beradi.
3. Qo'llash sohasi: Kichik ob'ektlar tasvirlarini kattalashtirish uchun ishlatiladi. Odatda biologiya, tibbiyot, mikroskopik zarralar va boshqalarni kuzatish uchun ishlatiladi.
konfokal mikroskop
1. Konfokal mikroskop aks ettirilgan yorug'lik yo'liga yarim aks ettiruvchi yarim linza qo'shadi, u allaqachon linzadan o'tgan aks ettirilgan yorug'likni boshqa yo'nalishlarga egadi. Fokus nuqtasida pin teshigi bo'lgan to'siq bor va kichik teshik markazlashtirilgan nuqtada joylashgan. Qopqoqning orqasida fotoko'paytiruvchi trubka joylashgan. Tasavvur qilish mumkinki, aniqlangan yorug'lik fokus nuqtasidan oldin va keyin aks ettirilgan yorug'lik ushbu konfokal tizim orqali kichik teshikka qaratilmaydi va to'siq tomonidan bloklanadi. Shunday qilib, fotometr o'lchaydigan narsa fokus nuqtasida aks ettirilgan yorug'likning intensivligidir.
2. Printsip: An'anaviy optik mikroskoplar dala yorug'lik manbasidan foydalanadi va namunadagi har bir nuqtaning tasviriga qo'shni nuqtalardan diffraktsiya yoki tarqoq yorug'lik ta'sir qiladi; Lazerli skanerlovchi konfokal mikroskop namunaning fokus tekisligidagi har bir nuqtani skanerlash uchun yoritilgan pin teshigidan oʻtuvchi lazer nuri hosil qilgan nuqtali yorugʻlik manbasidan foydalanadi. Namunadagi yoritilgan nuqta zond teshigida tasvirlanadi va prob teshigidan keyin fotoko'paytiruvchi trubka (PMT) yoki termoelektrik ulash moslamasi (cCCD) tomonidan nuqta yoki chiziq orqali qabul qilinadi va kompyuter monitori ekranida tezda lyuminestsent tasvirni hosil qiladi. . Yoritish teshigi va aniqlovchi pin teshigi ob'ektiv linzaning fokus tekisligiga nisbatan konjugatsiyalangan. Fokus tekisligidagi nuqtalar bir vaqtning o'zida yorug'lik teshigi va emissiya pin teshigiga qaratilgan va fokus tekisligidan tashqaridagi nuqtalar aniqlash pin teshigida tasvirlanmaydi. Bu umumiy mikroskop tasvirlarida loyqalikning kamchiligini bartaraf etib, namunaning optik kesmasi bo'lgan konfokal tasvirga olib keladi.
3. Qo'llash sohalari: tibbiyot, hayvonot va o'simliklar tadqiqotlari, biokimyo, bakteriologiya, hujayra biologiyasi, to'qimalar embriologiyasi, oziq-ovqat fani, genetika, farmakologiya, fiziologiya, optika, patologiya, botanika, nevrologiya, dengiz biologiyasi, materialshunoslik, elektron fan, mexanika , neft geologiyasi va mineralogiyasi.
