Floresan mikroskopiyaning printsipi va strukturaviy xususiyatlari
Floresan mikroskopiyasi qo'zg'atuvchi yorug'lik sifatida rang filtrlash tizimi orqali ma'lum bir to'lqin uzunligini (masalan, ultrabinafsha nur 3650 dyuym yoki binafsha ko'k yorug'lik 4200 dyuym) chiqarish uchun yuqori yorug'lik samaradorligiga ega nuqtadan foydalanadi va namunadagi floresan moddalarni turli xil nurlar chiqarish uchun qo'zg'atadi. floresan ranglari. Shundan so'ng, u ob'ektiv linza va okulyar kattalashtirish orqali kuzatiladi. Shu tarzda, flüoresans kuchli fonda, yuqori sezuvchanlik bilan juda zaif bo'lsa ham, tanib olish oson. U asosan hujayra tuzilishi va funktsiyasini, shuningdek kimyoviy tarkibini o'rganish uchun ishlatiladi. Floresan mikroskopning asosiy tuzilishi oddiy optik mikroskop va flüoresan yorug'lik manbai, qo'zg'atuvchi filtr, dikroik nurli ajratuvchi va blokirovka qiluvchi filtr kabi aksessuarlardan iborat. Floresan yorug'lik manbalarida odatda turli to'lqin uzunlikdagi yorug'lik chiqarishi mumkin bo'lgan ultra yuqori bosimli simob lampalar (50-200Vt) ishlatiladi. Biroq, har bir lyuminestsent modda eng kuchli floresan hosil qiluvchi qo'zg'atuvchi yorug'lik to'lqin uzunligiga ega, shuning uchun qo'zg'atuvchi filtrlarni (odatda ultrabinafsha, binafsha, ko'k va yashil qo'zg'atuvchi filtrlar) faqat ma'lum bir to'lqin uzunligi qo'zg'atuvchi yorug'lik ichiga kirib, nurlanishiga imkon berish uchun qo'shilishi kerak. boshqa barcha yorug'likni yutish paytida namuna. Qo'zg'atuvchi yorug'lik bilan nurlantirilgandan so'ng, har bir modda juda qisqa vaqt ichida nurlanish to'lqin uzunligidan uzoqroq ko'rinadigan floresansni chiqaradi. Floresansning o'ziga xos xususiyati bor va odatda qo'zg'atuvchi nurdan zaifroqdir. Muayyan floresansni kuzatish uchun ob'ektiv linzalari orqasida blokirovka (yoki bostirish) qo'shilishi va uni birgalikda ishlatish kerak.
Floresan mikroskop va oddiy mikroskop o'rtasidagi farq
1. Yoritish usuli odatda tushadigan nur turi bo'lib, unda yorug'lik manbai ob'ektiv linzalar orqali namunaga proektsiyalanadi;
2.Yorug'lik manbai ultrabinafsha nurlar bo'lib, oddiy mikroskoplarga qaraganda qisqaroq to'lqin uzunligi va yuqori piksellar sonini;
3.Ikkita maxsus filtr mavjud bo'lib, yorug'lik manbasi oldidagisi ko'rinadigan yorug'likni filtrlash uchun ishlatiladi va okulyar va ob'ektiv linzalari orasidagi biri inson ko'zini himoya qilish uchun ultrabinafsha nurlarni filtrlash uchun ishlatiladi.
Floresan mikroskopiyasi ham optik mikroskopning bir turi bo'lib, asosiy farq turli qo'zg'alish to'lqin uzunliklaridadir. Bu floresan mikroskopiya va oddiy optik mikroskopiya o'rtasidagi tuzilish va foydalanishdagi farqlarni aniqlaydi.
Floresan mikroskopiyasi immunofluoresans sitokimyosi uchun asosiy vositadir. U yorug'lik manbai, filtr plitasi tizimi va optik tizim kabi asosiy komponentlardan iborat. Flüoresansni chiqarish uchun namunani qo'zg'atish uchun yorug'likning ma'lum bir to'lqin uzunligidan foydalanadi va namunaning floresan tasvirini kuzatish uchun uni ob'ektiv linzalar va ko'zoynak tizimi orqali kattalashtiradi.






