Stereo floresan mikroskopdan foydalanish va ehtiyot choralari
Ko'rsatmalar:
(1) Materiallar varag'ini sahnaga qo'ying.
(2) Floresan mikroskopning kuchlanish stabilizatorini yoqing. Keyin UV chiroqni yoqish uchun boshlang'ich guruhini bosing va uni 15 daqiqa ichida o'chirmang va o'chirilgandan keyin 3 daqiqa ichida uni qayta ishga tushirmang.
(3) Qo'zg'atuvchi filtrni v ga, rang ajratish filtrini v ga aylantiring va 495 yoki 475 nm blokirovka qiluvchi filtrni tanlang.
(4) Mikroskopik tekshirish uchun uvFL40, uvFL100 floresan ob'ektiv mikroskopni tanlang.
(5) Slaydga lyuminestsent bo'lmagan moy qo'shing, avval 40 x foydalaning va keyin tekshirish uchun 100 x fokusli mikroskopdan foydalaning. Floresan paydo bo'ladi.
(7) Floresan moddalarning floresansi ultrabinafsha nurlar bilan nurlantirilganda vaqt o'tishi bilan asta-sekin zaiflashganligi sababli, mikroskopik tekshirish paytida ko'rish maydonini tez-tez o'zgartirish kerak.
(8) uvFL10 yoki uvFL20 past kattalashtiruvchi mikroskoplar materiallarni tekshirish uchun ham ishlatilishi mumkin (past quvvatli linzalardan foydalanganda lyuminestsent moy qo'shilmaydi).
Floresan tasvirini yozib olish usuli:
Flüoresan mikroskop tomonidan ko'rilgan floresan tasviri ham morfologik xususiyatlarga, ham floresans rangi va yorqinligiga ega. Natijalarni baholashda har tomonlama xulosa chiqarish uchun ikkalasini birlashtirish kerak. Natijalar sub'ektiv ko'rsatkichlar, ya'ni ishchilar tomonidan vizual kuzatish asosida qayd etiladi. Umumiy sifat kuzatuvi sifatida, asosan ishonchli. Texnologiya va fanning rivojlanishi bilan ob'ektiv ko'rsatkichlar, masalan, hujayra spektrofotometrlari, tasvir analizatorlari va boshqa asboblar kabi turli darajadagi hukm natijalarini qayd etish uchun ishlatiladi. Biroq, ushbu vositalar tomonidan qayd etilgan natijalar ham sub'ektiv mulohazalar bilan birlashtirilishi kerak.
Floresan mikroskop bilan suratga olish floresan tasvirlarni yozish uchun juda zarur. Floresansiyani susaytirish va zaiflashtirish oson bo'lganligi sababli, natijalarni real vaqtda yozib olish kerak. Usul asosan oddiy fotomikrografiya bilan bir xil. Faqat ASA200 yoki undan yuqori yoki 24. yuqoridagi kabi yuqori tezlikda fotosensitiv plyonkadan foydalanish kerak. Ultrabinafsha nurlar FITC belgilari kabi floresan o'chirishga kuchli ta'sir ko'rsatadiganligi sababli, 30 soniya davomida ultrabinafsha nurlar bilan nurlantirilganda floresan yorqinligi 50 foizga kamayadi. Shuning uchun, agar ta'sir qilish tezligi juda sekin bo'lsa, floresan tasvirni olish mumkin emas. Umumiy tadqiqot floresan mikroskoplari yarim avtomatik yoki to'liq avtomatik fotomikrografiya tizimi qurilmalariga ega.
Ehtiyot choralari:
(1) Floresan mikroskop zavodi ko'rsatmalarining talablariga muvofiq qat'iy ishlang va dasturni o'z xohishiga ko'ra o'zgartirmang.
(2) Tekshirish qorong'i xonada o'tkazilishi kerak. Qorong'i xonaga kirganingizdan so'ng, quvvat manbaiga ulang va o'ta yuqori bosimli simob chiroqni 5-15 daqiqa davomida yoqing. Yorug'lik manbasidan kuchli yorug'lik barqaror bo'lgandan so'ng, ko'zlar qorong'i xonaga to'liq moslashtiriladi va keyin namunani kuzatishni boshlaydi.
(3) Ultrabinafsha nurlar ko'zlarga zarar bermasligi uchun yorug'lik manbasini sozlashda himoya ko'zoynak taqish kerak.
(4) Tekshirish vaqti afzalroq har safar 1-2 soat. Agar u 90 daqiqadan oshsa, ultra yuqori bosimli simob chiroqning yorug'lik intensivligi asta-sekin kamayadi va floresan zaiflashadi; namuna ultrabinafsha nurlar bilan 3-5 daqiqa davomida nurlantirilgandan so'ng, floresans ham sezilarli darajada zaiflashadi; shuning uchun u ko'pi bilan 2-2 soatdan oshmasligi kerak. 3 soat.
(5) Floresan mikroskopining yorug'lik manbasining ishlash muddati cheklangan va vaqtni tejash va yorug'lik manbasini himoya qilish uchun namunalar birgalikda tekshirilishi kerak. Havo issiq bo'lsa, issiqlikni yo'qotish uchun fanatlar qo'shilishi kerak va yangi lampochkalarni ishlatish vaqtidan boshlab yozib olish kerak. Chiroq o'chgandan so'ng uni yana ishlatmoqchi bo'lsangiz, uni yoqishdan oldin lampochkaning etarlicha sovishini kutishingiz kerak. Kuniga bir necha marta yorug'lik manbasini yoqishdan saqlaning.
(6) Namunani bo'yashdan keyin darhol kuzatib boring, chunki vaqt o'tishi bilan floresan asta-sekin zaiflashadi. Namuna polietilen plastik to'rva ichida 4 daraja haroratda saqlansa, floresan zaiflashuv vaqtini kechiktirish va o'rnatish vositasining bug'lanishini oldini olish mumkin.
(7) Floresan yorqinligining hukm standarti: u odatda to'rt darajaga bo'linadi, ya'ni "bir" - yo'q yoki zaif floresan ko'rinmaydi. " plus "—Faqat aniq ko'rinadigan floresan ko'rish mumkin. " plus plus "— Ko'rinadigan va yorqin
