Mikroskop slaydlarini yasash usuli
Mikroskop slaydlarini tayyorlashning uchta usuli mavjud:
1. Smear usuli
Smear usuli - material slaydga bir tekis taqsimlanadigan tayyorlash usuli.
Smear materiallariga bir hujayrali organizmlar, mayda suv o'tlari, qon, bakterial kulturalar, o'simlik va hayvonlarning bo'sh to'qimalari, sperma uyalari, anterlar va boshqalar kiradi.
Qo'llashda e'tibor berish kerak:
(1) Slayd toza bo'lishi kerak.
(2) Slaydni tekis ushlab turish kerak.
3) Qoplama bir xil bo'lishi kerak. Qoplama suyuqligining tomchisini slaydning o'rtasining o'ng tomoniga qo'ying va uni kesuvchi pichoq yoki tish pichog'i va boshqalar bilan yaxshilab yoying.
4) Qoplama yupqa bo'lishi kerak. Boshqa slaydni itaruvchi sifatida foydalaning, slayd yuzasi bo'ylab o'ngdan chapga asta-sekin suring (ikki slayd orasidagi burchak 30 dan 45 gradusgacha bo'lishi kerak) va bir xil nozik bir qatlamni qo'llang.
5) Fiksatsiya. Agar fiksatsiya zarur bo'lsa, kimyoviy fiksator yoki quritish (bakterial) fiksatsiyasidan foydalaning.
6) Bo'yash. Bakteriyalar uchun metilen ko'k, qon uchun Reychel dog'idan foydalaning. Binoni eritmasi butun qoplangan sirtni qoplashi kerak.
7) yuving. Absorbent qog'ozga soling yoki quruq pishiring.
8) Filmni yoping. Uzoq muddatli saqlash uchun Kanada daraxti filmidan foydalaning.
2. Filmni bosish usuli
Bosim plyonka usuli - bu slayd va qopqoq varaqlari orasiga joylashtirilgan biologik material bo'lib, ma'lum bir bosimni qo'llagan holda, to'qima hujayralari tayyorlash usuli bilan bosiladi.
(1) materialni oling. Hujayra bo'linishini, hujayra bo'linishini kuzatish uchun material sifatida ko'tarilgan, yangi to'qima hujayralari tanlanishi kerak. Ildiz uchlari, poya uchi meristematik to'qima, suyak iligi hujayralari, anterlar (polen ona hujayralari) kabi. Spermatozoidlar uyasi (spermatogoniya) va boshqalar.
(2) Fiksatsiya. Materialning fiksatsiyasi ehtiyojga qarab aniqlanishi mumkin, materialning bosimi plyonkasini kuzatishdan so'ng darhol alohida sobit ishlov berish (va bo'yash sinxron) amalga oshirilmaydi; tekshirishdan so'ng darhol emas, balki materialni oling, material fiksator bilan (odatda alkogol asetat fiksatori bilan) o'rnatilishi mumkin. Ruxsat etilgan 2 ~ 24 soat (materialga qarab) 95% etanol bilan yuvilgandan so'ng, 70% etanolda saqlanadi, kutish rejimida.
(3) Dissotsiatsiya. Hujayralar materialni gidroliz ajratish eritmasi (masalan, 1N HCl yoki xlorid kislotasi spirtli eritma) bilan davolash, umumiy ishlov berish 6 ~ 20 min, dissotsiatsiyadan keyin va binoni oldidan suv bilan yuvish oson emas.
(4) Bo'yash. Ko'p turdagi dog'lar mavjud. Xromosomalarni kuzatish odatda magenta asetat bo'yash eritmasi bilan bo'yash uchun ishlatiladi.
(5) Filmni bosish. Materialni slaydga qo'ying, bir tomchi suv yoki binoni eritmasi qo'shing, qoplamani yoping va slaydni bosh barmog'ingiz bilan sekin bosing.
(6) Kuzatish. Filmni bosgandan so'ng, uni mikroskop ostida kuzatish mumkin.
