Lazerli konfokal skanerlash mikroskopi
Lazerli konfokal skanerlash mikroskopi (lazerli konfokal skanerlash mikroskopi), lazerni skanerlovchi yorug'lik manbai sifatida ishlatish, nuqta bo'yicha tez skanerlash va tasvirlash, skanerlash lazeri va flüoresans to'plami ob'ektiv ob'ektivni va ob'ektiv linzalarni birlashtiradi. lazer nurining fokus nuqtasini skanerlaydi, bu ham materiyaning bir lahzali ko'rish nuqtasidir. Lazer nurlarining to'lqin uzunligi qisqa va nur juda nozik bo'lganligi sababli, konfokal lazerli skanerlash mikroskoplari yuqori aniqlikka ega, bu oddiy optik mikroskopdan taxminan 3 baravar ko'p. Tizim bir marta fokuslangandan so'ng, skanerlash namunaning bir tekisligi bilan cheklanadi. Fokuslash chuqurligi boshqacha bo'lsa, namunaning turli xil chuqurlik darajalarining tasvirlarini olish mumkin. Ushbu tasvir ma'lumotlari kompyuterda saqlanadi. Kompyuter tahlili va simulyatsiyasi orqali hujayra namunasining uch o'lchovli tuzilishi ko'rsatilishi mumkin.
Nima uchun konfokal mikroskop kerak?
1. Bizning buyuk salaflarimizning sa'y-harakatlari va takomillashuvlaridan so'ng, optik mikroskop mukammallik darajasiga yetdi. Darhaqiqat, oddiy mikroskoplar bizga go'zal mikroskopik tasvirlarni sodda va tez taqdim etishi mumkin. Biroq, bu deyarli mukammal mikroskop dunyosiga inqilobiy yangilik olib kelgan voqea sodir bo'ldi, bu "lazerli skanerlash konfokal mikroskop" ixtirosi. Ushbu yangi turdagi mikroskopning xususiyati shundaki, u optik tizimni qabul qiladi, u faqat fokus to'plangan sirtdagi tasvir ma'lumotlarini chiqaradi va fokusni o'zgartirganda olingan ma'lumotni tasvir xotirasida tiklaydi, shunda to'liq 3D ma'lumot olish mumkin bo'ladi. olingan. Aql-idrokning yorqin tasviri. Ushbu usul yordamida oddiy mikroskop bilan tasdiqlab bo'lmaydigan sirt shakli haqidagi ma'lumotlarni osongina olish mumkin. Bundan tashqari, oddiy optik mikroskoplar uchun "ravshanlikni oshirish" va "fokus chuqurligini chuqurlashtirish" qarama-qarshi shartlardir, ayniqsa yuqori kattalashtirishda bu qarama-qarshilik ko'proq namoyon bo'ladi, ammo konfokal mikroskoplar nuqtai nazaridan bu muammo osonlikcha hal qilinadi.
2. Konfokal optik tizimning afzalliklari
Lazerli konfokal mikroskopning sxematik diagrammasi
Konfokal optik tizim namunada nuqtali yoritishni amalga oshiradi va aks ettirilgan yorug'lik nuqta retseptorlari tomonidan ham qabul qilinadi. Namuna fokus holatiga qo'yilganda deyarli barcha aks ettirilgan yorug'lik fotoretseptorga etib borishi mumkin va namuna fokusdan tashqarida bo'lsa, aks ettirilgan yorug'lik fotoreseptorga etib bormaydi. Ya'ni, konfokal optik tizimda faqat fokus nuqtasiga to'g'ri keladigan tasvir chiqariladi va yorug'lik nuqtalari va keraksiz tarqoq yorug'lik himoyalanadi.
3. Nima uchun lazerdan foydalanish kerak?
Konfokal optik tizimda namuna bir nuqtada yoritiladi va aks ettirilgan yorug'lik ham nuqta fotoreseptorlari tomonidan qabul qilinadi. Shuning uchun nuqtali yorug'lik manbai zarur bo'ladi. Lazerlar juda nuqtali yorug'lik manbalaridir. Ko'pgina hollarda lazer yorug'lik manbalari konfokal mikroskoplar uchun yorug'lik manbalari sifatida ishlatiladi. Bundan tashqari, lazerning monoxromatikligi, yo'nalishi va mukammal nur shaklining xususiyatlari ham uni keng qo'llashning muhim sabablari hisoblanadi.
4. Yuqori tezlikda skanerlash asosida real vaqt rejimida kuzatish mumkin bo'ladi
Lazerli skanerlash uchun gorizontal yo'nalish akustik optik deflektorni (AO elementi) qabul qiladi va vertikal yo'nalish servo elektron boshqariladigan nurli skanerlash oynasini (Servo Galvano-oyna) qabul qiladi. Akusto-optik burilish moslamasi mexanik tebranish qismiga ega emasligi sababli, u yuqori tezlikda skanerlashni amalga oshirishi mumkin va monitor ekranida real vaqt rejimida kuzatish mumkin. Ushbu yuqori tezlikda tasvirlash diqqatni jamlash va pozitsiyani olish tezligiga bevosita ta'sir qiluvchi juda muhim elementdir.
