Lazerli skanerlash Multifotonli mikroskopning yaxshilangan afzalliklari
Lazerli skanerlash multifotonli mikroskop optik mikroskopiyaning asosiy takomillashuvi bo'lib, asosan tirik hujayralar, sobit hujayralar va to'qimalarning chuqur tuzilishini kuzatish uchun mo'ljallangan va aniq va aniq ko'p qatlamli Z-tekislik tuzilmalarini, ya'ni optik bo'laklarni olishi va qurishi mumkin. Namunaning uch o'lchovli qattiq tuzilishi. Konfokal mikroskop lazerli yorug'lik manbasidan foydalanadi, u ob'ektiv linzaning butun orqa fokus tekisligini to'ldirish uchun kengaytiriladi va keyin ob'ektiv linzalarning linzalari tizimi orqali namunaning fokus tekisligida juda kichik nuqtaga birlashadi. Ob'ektivning raqamli diafragmasiga qarab, eng yorqin yoritish nuqtasining diametri taxminan 0,25 ~ 0,8 mkm, chuqurligi esa taxminan 0,5 ~ 1,5 ni tashkil qiladi. mkm. Konfokal nuqtaning o'lchami mikroskopning dizayniga, lazer to'lqin uzunligiga, ob'ektiv linzalarning xususiyatlariga, skanerlash birligining holatiga va namunaning tabiatiga bog'liq. Dala mikroskoplari yorug'likning katta diapazoni va yorug'likning katta chuqurligiga ega, konfokal mikroskoplar esa fokus tekisligidagi fokus nuqtasida to'plangan yoritishga ega. Konfokal mikroskopiyaning eng asosiy afzalligi shundaki, u qalinligi taxminan 0,5 dan 1,5 mkm gacha bo'lgan qalin lyuminestsent namunalarni (50 mkm yoki undan ko'proq) nozik optik kesishni amalga oshirishi mumkin. Mikroskop Z o'qi step motori yordamida namunani yuqoriga va pastga siljitish orqali bir qator optik qism tasvirlarini olish mumkin. Tasvir ma'lumotlarini olish tekislik ichida boshqariladi va namunadagi boshqa joylardan kelgan signallarga xalaqit bermaydi. Fon floresansining ta'sirini olib tashlaganingizdan va signal-shovqin nisbatini oshirgandan so'ng, konfokal tasvirlarning kontrasti va o'lchamlari an'anaviy maydon yoritgichli floresan tasvirlari bilan solishtirganda sezilarli darajada yaxshilanadi. Ko'pgina namunalarda ko'plab murakkab strukturaviy komponentlar murakkab tizimlarni hosil qilish uchun bir-biriga bog'langan, ammo etarlicha optik qismlar to'plangandan so'ng, biz ularni dasturiy ta'minot orqali 3D formatida qayta qurishimiz mumkin. Ushbu eksperimental yondashuv biologik tadqiqotlarda hujayralar yoki to'qimalar o'rtasidagi murakkab strukturaviy va funktsional munosabatlarni yoritishda keng qo'llanilgan.
