Mikroskopning aniqligini qanday oshirish mumkin?
Mikroskop sinov uskunasining asosiy jihozlaridan biri bo'lib, mikroskopning ishlashini baholash uchun muhim ko'rsatkich bu o'lchamlari. Ruxsat ikki kichik nuqta yoki ikkita chiziq orasidagi kichik masofani aniq ajratish qobiliyatini anglatadi. Inson ko'zining o'zi mikroskopdir. Standart yoritish sharoitida inson ko'zining ko'rish masofasidagi o'lchamlari (xalqaro miqyosda 25 sm deb tan olingan) taxminan 1/10 mm. Ikki to'g'ri chiziqni kuzatish uchun ko'zning o'lchamlari yaxshilanishi mumkin, chunki to'g'ri chiziqlar bir qator nerv hujayralarini rag'batlantirishi mumkin.
Inson ko'zining o'lchamlari atigi 1/10 mm, shuning uchun inson ko'zi 1/10 mm dan kichikroq narsalarni yoki 1/10 mm dan yaqinroq bo'lgan ikkita kichik ob'ekt orasidagi masofani ajrata olmaydi. Shunday qilib, oddiy makroskopik lupadan mikroskopik kuzatish uchun optik mikroskopgacha, keyin esa elektron mikroskop paydo bo'ldi. Mikroskopning o'lchamlari namunada aniq echilishi mumkin bo'lgan ikkita kichik nuqta orasidagi eng kichik masofa sifatida aniqlanadi. Uning hisoblash formulasi: D=0.61l/NA
Formulada: D - rezolyutsiya (um); l - yorug'lik manbasining to'lqin uzunligi (um); NA - ob'ektiv linzalarning raqamli diafragma (diafragma nisbati deb ham ataladi).
Mikroskopning o'lchamlari tushayotgan yorug'lik manbasining to'lqin uzunligiga va mos keladigan ob'ektiv linzasining raqamli diafragmasiga bog'liqligini formuladan olish mumkin. Ko'rinib turibdiki, optik mikroskopni takomillashtirish usuli:
1. Yorug'lik manbasining to'lqin uzunligini kamaytiring.
Ko'rinadigan yorug'likning qisqaroq to'lqin uzunligi 390nm. Agar yorug'lik manbai sifatida ushbu to'lqin uzunligidagi ultrabinafsha nurlar ishlatilsa, optik mikroskopning o'lchamlari 0,2 um gacha kamayishi mumkin. Biroq, eng keng tarqalgan materiallarning shishasi 340 nm dan past to'lqin uzunligi bilan ko'p miqdorda yorug'likni o'zlashtirganligi sababli, ultrabinafsha nurlar katta miqdordagi zaiflashuvdan keyin aniq va yorqin tasvirni hosil qila olmaydi. Shuning uchun kvarts (200 nm gacha ultrabinafsha nurlar orqali o'tishi mumkin) va florit (185 nm gacha ultrabinafsha nurlar orqali o'tishi mumkin) kabi qimmatbaho materiallardan foydalanish kerak va ultrabinafsha nur mikroskopini yalang'och ko'z bilan kuzatish mumkin emas. , va hatto kuzatilgan namuna Mikroskopning cheklovlari tufayli, yuqori narx bilan bir qatorda, mikroskopning ruxsatini yaxshilashning bu usuli o'zining cheklovlari tufayli keng qo'llanilmaydi.
2. Obyektiv linzaning NA raqamli diafragmasini oshiring.
Raqamli diafragma NA=n*sin(u)
Formulada n - ob'ektiv linza va namuna o'rtasidagi muhitning sinishi ko'rsatkichi; u - ob'ektiv linzaning yarim diafragma burchagi. Shu sababli, optik dizayn nuqtai nazaridan, kattaroq diafragma burchagini mos ravishda qabul qilish yoki sinishi indeksini oshirish optik mikroskopning ruxsatini yaxshilashning keng tarqalgan usuliga aylandi. Odatda, 10X dan past bo'lgan past kattalashtiruvchi ob'ektiv linzalari muhiti havo va uning sinishi indeksi 1, ya'ni quruq ob'ektiv linzalari; suvga cho'mish muhiti distillangan suv bo'lib, uning sindirish ko'rsatkichi 1,33; moyga botirish ob'ektiv linzalari muhiti sadr yog'i yoki boshqa shaffof yog'dir, uning sinishi ko'rsatkichi umumiy 1,52 atrofida, linza va shisha slaydning sinishi indeksiga yaqin, masalan, Olympusning 100X moyli linzalari. Suvga cho'mdiruvchi ob'ektiv linzalari va moyli ob'ektiv linzalari nafaqat yuqori kattalashtirishga ega, balki yuqori sinishi indeksli muhitdan foydalanish tufayli ob'ektiv linzalarning o'lchamlarini yaxshilaydi.
