Tegishli floresan mikroskopni qanday tanlash mumkin
Floresan mikroskopi - bu laboratoriya va patologiya bo'limlaridagi standart mikroskopik tasvirlash uskunasi bo'lib, u kuzatish va tasvirlash uchun floresans xususiyatlaridan foydalanadi. U hujayra biologiyasi, neyrobiologiya, botanika, mikrobiologiya, patologiya, genetika va boshqalar kabi turli sohalarda keng qo'llaniladi. Floresan tasvirlash yuqori sezuvchanlik va o'ziga xoslik afzalliklariga ega bo'lib, u o'ziga xos oqsillar, organellalar va boshqalarning tarqalishini kuzatish uchun juda mos keladi. to'qimalarda va hujayralarda, birgalikda lokalizatsiya va o'zaro ta'sirlarni o'rganish, ion konsentratsiyasining o'zgarishi kabi hayotiy dinamik jarayonlarni kuzatish.
Mikroskoplarni tanlash
Floresan mikroskoplari asosan uchta toifaga bo'linadi: tik floresan mikroskoplar (tilim uchun mos), teskari floresan mikroskoplar (tirik hujayralar uchun, shuningdek, kesish uchun mos) va stereo lyuminestsent mikroskoplar (kattaroq namunalar uchun mos (o'simliklar, zebralar) embrion), medaka, sichqon / kalamush organlari va boshqalar).
Floresan filtr bloklarini tanlash
Filtr bloklarini tanlash nafaqat floresan zondlarning qo'zg'alish va emissiya to'lqin uzunliklarini hisobga olishi kerak, balki o'ziga xos bo'lmagan qo'zg'alish bor-yo'qligini va ko'p rangli etiketli namunalar uchun rang o'zaro bog'liqligi mavjudligini ham hisobga olishi kerak. Tajribada biz qo'zg'alish uchun iloji boricha qo'zg'alish cho'qqisiga eng yaqin to'lqin uzunligini tanlaymiz va qabul qilish diapazoni eng yuqori emissiyani o'z ichiga olishi kerak. Alexa Fluor 488 ning qo'zg'alish cho'qqisi 500 nm ni tashkil qiladi va floresan mikroskopda 480/40 qo'zg'atuvchi filtrni tanlash mumkin. Floresan mikroskopida keng tarqalgan ishlatiladigan floresan filtr bloklarini ikki turga bo'lish mumkin: uzoq o'tish (LP) va tarmoqli o'tish (BP), ular ham ehtiyojlarga qarab tanlanishi kerak.
Konfokal mikroskop
An'anaviy lyuminestsent mikroskopiya kuzatuvlarida, lyuminestsent yorliqli moddalar va o'z-o'zidan paydo bo'ladigan floresan tuzilmalarning bir-biriga mos kelishi tufayli ular bir-biriga mahkam bog'langan. Biroq, an'anaviy tushadigan floresan mikroskopning maqsadlari nafaqat fokus tekisligidan yorug'likni yig'ibgina qolmay, balki yorug'likni fokus tekisligida yuqoriga va pastga tarqatadi, bu esa tasvir o'lchamlari va kontrastini sezilarli darajada kamaytiradi.
Konfokal tasvir faqat o'z-o'zini fokuslash tekisligidan aks ettirilgan yorug'likni aniqlaydi va shu bilan yuqoridagi muammoni hal qiladi. Yorug'lik manbai fokus tekisligida pin teshigi orqali kichik va nozik nuqta hosil qiladi va fokus tekisligidan chiqarilgan yorug'lik ob'ektiv linzalar orqali to'planadi. Ob'ektiv linzaning fokus tekisligidan yuqorida yoki pastda joylashgan nuqtalardan chiqarilgan floresansning ko'p qismi pin teshigiga yaqinlasha olmaydi. Fokus tekisligida joylashgan lyuminestsent va defokuslangan lyuminestsentning kichik qismi pin teshigidan o'tishi mumkin, ayni paytda fokus tekisligidan tashqaridagi yorug'lik nurlari pin teshigi plastinkasining oldida yoki orqasida birlashadi va detektorga pin teshigi orqali kirishi bloklanadi. Aniqlangan tasvir fokus tekisligidan olingan, shuning uchun yakuniy tasvir sifati sezilarli darajada yaxshilanadi.
Lazerli skanerlash konfokal mikroskopining turli afzalliklari va amaliyligi tufayli u hozirda yuqori aniqlikdagi hujayra biologiyasi, botanika va hujayra tadqiqoti sohalarida ajralmas eksperimental yordamchi hisoblanadi. Shu bilan birga, kelajakdagi ilmiy tadqiqot markazlarida u eng asosiy va asosiy tadqiqot vositasi bo'ladi.
