Konfokal mikroskopiya uchun lyuminestsent zondlarni tanlash bosqichlari va usullarini batafsil tavsiflab bering
Konfokal mikroskoplar bilan o'tkazilgan tajribalarda ba'zi eksperimental ko'rsatkichlar namunaning o'zi yoki ekzogen moddalarning avtoflüoresansi yordamida aniqlanishi mumkin, ammo tekshiriladigan moddalarning ko'pchiligi o'lchanadigan floresansga ega emas va floresan zondlar bilan etiketlanishi kerak. U o'lchanadigan lyuminestsent signalga ega. Xo'sh, konfokal mikroskop uchun floresan problarni qanday tanlash mumkin?
1. Tajriba maqsadiga ko'ra tekshiriladigan ko'rsatkichlarni aniqlang
Aniqlash indeksi aniqlangandan so'ng, floresan problarni tanlash diapazoni ham aniqlanadi. Ko'rinib turibdiki, tajribada qaysi lyuminestsent zonddan foydalanishni tanlash tajriba maqsadi bilan belgilanadi. Masalan, agar tajribaning maqsadi atriyal fibrilatsiya sodir bo'lganda kardiomiotsitlardagi kaltsiy ionlarining o'zgarishini o'rganish bo'lsa, tekshiriladigan modda kardiomiotsitlardagi kaltsiy ionlari ekanligini va floresan zondlarning tanlov diapazoni bilan cheklanganligini aniqlash mumkin. tirik hujayralarni belgilashi mumkin bo'lgan kaltsiy ionlari problari. Igna.
2. Mavjud lyuminestsent zondlar diapazonini aniqlang
Yangi eksperimental moddalar yoki ko'rsatkichlar uchun, agar tajribaning maqsadi yangi lyuminestsent zondlarni o'rganish bo'lmasa, siz etuk zondlar va etiketkalash usullarini qo'llashni tanlashingiz mumkin. Sinov qilinadigan moddani belgilashi mumkin bo'lgan lyuminestsent zondlarning turi yoki diapazoni nufuzli adabiyotlarni yoki uyda va chet elda taniqli reagent kompaniyalarining mahsulot kataloglarini qidirish orqali aniqlanishi mumkin.
3. Floresan zondning xarakteristikalari lyuminestsent namunalarni tayyorlash talablariga javob beradimi yoki yo'qligini o'rganing.
Floresan zondlarning xarakteristikalari bevosita namunalarning markalanishiga va eksperimental natijalarga ta'sir qiladi. Shuning uchun, floresan zondlarni tanlash va tajribada namunalarni markalashdan oldin, ularning floresan xususiyatlarini to'liq tushunish kerak. Tekshiriladigan lyuminestsent zondlarning xususiyatlari quyidagilardan iborat:
1. Yorug'lik zondlari va namunalarining reaksiya xarakteristikalari
2. Floresan zondlarning sezuvchanligi va lyuminestsent intensivligi
3. Floresan zondlar bilan belgilangan namunalarning spektral xossalari
4. Floressensiyaning barqarorligi
5. Namunadagi bir nechta floresansning o'zaro ta'siri
