Fazali kontrastli mikroskopiya uchun nosozliklarni tuzatish usullari va bosqichlari
a. Kuhler yoritish tizimini sozlash asosida namunani aniq yo'naltirish uchun yorqin maydon usulidan foydalaning;
b. Spot chiroqni Ph1 ga aylantiring va uni aylanuvchi patnisdagi o'lchov chizig'i bilan tekislang. 10 x fazali kontrastli ob'ektivni tanlang va uni kuzatilishi kerak bo'lgan shaffof namuna bilan almashtiring;
c. Ko'zoynaklardan birini olib tashlang, uni markazlashtiruvchi teleskop bilan almashtiring va ko'rish maydonidagi ikkita kontrastli halqaga (ob'ektiv linzaning qora kontrastli halqasi va kondensator linzasining o'tkazuvchanlik kontrasti halqasi) e'tibor bering;
d. Ko'rish sohasidagi ikkita farq halqalari bir-biriga mos kelmasligi mumkin. Yoritgichdagi ikkita sozlash moslamasini sozlang (farqli halqalarning chap va o'ng holatini sozlash novdalari va old va orqa pozitsiyalarni sozlash uchun ishqalanish turi tugmachalari bilan sozlang), shaffof halqa qora halqaga to'g'ri kelishi uchun oldinga va orqaga siljiydi. ;
e. Moslashtirgandan so'ng, kuzatuv ko'zoynagiga qayting va namunaning fazalar farqi tasvirini kuzatish uchun yashil filtrni optik yo'lga bosing;
f. 20 x va 40 x ob'ektiv linzalar bilan kuzatilganda, spotlight Ph2 holatiga o'rnatilishi kerak va 100 x ob'ektiv linzalardan foydalanilganda, spotlight Ph3 holatiga o'rnatilishi kerak.
Qo'llash sohasi: Shaffof, bo'yalmagan yoki bo'yalmagan namunalarni, masalan, turli hujayralar, tirik to'qimalar, bo'yalmagan yoki bo'yalmagan to'qimalar bo'laklari, suv organizmlari va boshqalarni kuzatish uchun javob beradi.
Fazali kontrastli mikroskopning asosiy printsipi
Yorug'lik nisbatan shaffof namunadan o'tganda, yorug'likning to'lqin uzunligi (rangi) va amplitudasi (yorqinligi) da sezilarli o'zgarishlar bo'lmaydi. Shuning uchun, oddiy optik mikroskop ostida bo'yalmagan namunalarni (masalan, tirik hujayralar) kuzatganda, ularning morfologiyasi va ichki tuzilishini farqlash ko'pincha qiyin. Biroq, hujayraning turli qismlarining sinishi indeksi va qalinligidagi farqlar tufayli, bu namunadan o'tganda to'g'ridan-to'g'ri va diffraktsiyali yorug'likning optik yo'lida farqlar bo'ladi. Optik yo'lning ortishi yoki kamayishi bilan yorug'lik to'lqinlarining tezlashishi yoki orqada qolishi fazasi o'zgaradi (natijada fazalar farqi). Yorug'likning fazalar farqini yalang'och ko'z bilan sezish mumkin emas, lekin fazalar farqi mikroskop o'zining maxsus qurilmasi - dumaloq diafragma va faza plitasidan foydalanishi va yorug'likning fazalar farqini amplituda farqiga aylantirish uchun yorug'likning interferentsiya fenomenidan foydalanishi mumkin. (yorug'lik va qorong'u farq) inson ko'zi bilan aniqlanishi mumkin. Bu asl shaffof ob'ektni aniq yorug'lik va qorong'i farqlarni ko'rsatishga imkon beradi, kontrastni kuchaytiradi va oddiy optik mikroskoplar va qorong'u maydon mikroskoplari ostida ko'rinmaydigan yoki aniq ko'rinmaydigan hujayralar ichidagi tirik hujayralar va ma'lum nozik tuzilmalarni aniq kuzatish imkonini beradi.
Fazali kontrastli mikroskopning tasvirlash printsipi: Optik manba faqat dumaloq diafragmaning shaffof halqasidan o'tishi mumkin, keyinchalik u yorug'lik nuriga qaratilgan. Ushbu yorug'lik nuri tekshirilayotgan ob'ektdan o'tganda, har bir qismning turli xil optik yo'llari tufayli u turli darajadagi og'ish (diffraktsiya) ga uchraydi. Shaffof halqadan hosil bo'lgan tasvir faza plitasidagi konjugat yuzasi va ob'ektiv linzalari orqasidagi fokus tekisligi bilan mos kelishi tufayli. Shuning uchun, og'ilmagan to'g'ridan-to'g'ri yorug'lik konjugat sirtidan o'tadi, difraksiyalangan yorug'lik esa kompensatsiya yuzasi orqali o'tadi. Fazali plastinkadagi konjugat yuzasi va kompensatsiya yuzasining turli xil xususiyatlari tufayli ular mos ravishda ma'lum bir faza farqini va bu ikki qismdan o'tadigan yorug'likning intensivligini pasaytiradi. Keyin ikkita yorug'lik to'plami orqa linzalar orqali birlashadi va bir xil optik yo'l bo'ylab harakatlanadi, bu to'g'ridan-to'g'ri va difraksiyalangan yorug'lik o'rtasida interferensiyaga olib keladi va fazalar farqini amplituda farqiga o'zgartiradi. Shu tariqa, fazali kontrastli mikroskopda inson ko‘zi bilan ajrata olmaydigan fazalar farqi rangsiz shaffof jismning yorug‘ligi orqali inson ko‘zi bilan farqlanadigan amplituda farqiga (yorqinlik farqiga) aylanadi.
