To'qimalar bloklari hajmi bo'yicha biologik mikroskop
Biologik mikroskop Hozirgacha sovuq fiksatsiya, muzlatilgan ultra yupqa kesma va muzlatish quritish to'qimalar va hujayralarning rentgen mikro-kesmasi uchun odatiy usullardir. Quyida ushbu usulning tafsilotlari keltirilgan:
Biologik mikroskoplar. Kondensatorli mikroskoplar uchun o'rtacha yorqinlikka erishish uchun kondensatorni yuqoriga va pastga siljitish mumkin. Bundan tashqari, o'zgaruvchan yorug'lik chiqaradigan diodlarning diafragmasini o'rtacha 9b yorqinlikka erishish uchun o'zgartirish mumkin. Agar yorug'lik yorqin bo'lsa, kondensator mos ravishda ko'tarilishi va o'zgaruvchan yorug'likning diafragmasini mos ravishda kengaytirish mumkin. Agar yorug'lik juda kuchli bo'lsa, kondensatorni mos ravishda tushirish va o'zaro faoliyat nurning diafragmasini mos ravishda kamaytirish mumkin. Agar siz hali ham bu vaziyatda ko'zni qamashtiradigan his qilsangiz, mos filtrni tanlashingiz va uni kondanser ostidagi qavsga qo'yishingiz mumkin. Shunday qilib, sizni qoniqtiradigan yorqinlikni olishingiz mumkin. Albatta, o'zgaruvchan diafragma o'lchamiga erishish va tegishli filtrlarni tanlash uchun kondanserning yuqoriga va pastga holatini sozlash bo'yicha tajriba orttirish uchun ma'lum bir amaliyot davri talab etiladi.
Biologik mikroskopiyadagi juda muhim masala shundaki, hujayralarni yig'ish va ajratish jarayonida, muzlatish bilan quritish va qatronlarni joylashtirishdan keyin (FD), o'ta yupqa granulalarni muzlatishdan keyin va muzlatish bilan quritgandan so'ng, har bir qismning 65 element tarkibi bo'lishi kerak. juda ehtiyotkorlik bilan tahlil qiling va tahlil qilinadigan hujayralarga mutlaqo zarar yetkazmang. Chunki rentgen mikro-hududini tahlil qilish nafaqat ko'p bosqichlarni o'z ichiga oladi, balki juda katta xarajatlarni ham o'z ichiga oladi. Agar uzoq vaqt va bir necha bosqichlardan so'ng, tahlil qilingan hujayralar zararlangan hujayralar yoki o'lik hujayralar bo'lsa, noto'g'ri xulosalar chiqarish achinarli bo'ladi. Masalan, kollagenaza bilan davolashdan keyin ajratilgan kardiomiotsitlar ikkita shaklga ega bo'lib, biri uzun tayoqcha, ikkinchisi yumaloq. Ikkinchisi hujayra izolyatsiyasi paytida zarar ko'rgan o'layotgan hujayralardir.
Biologik mikroskopiya Bu ikki turdagi hujayralardagi elektrolitlarning tarkibi va taqsimlanishi juda farq qiladi. Dumaloq kardiomiotsitlarda Na juda yuqori, K esa juda past, chiziqli shoxlardagi Ca kontsentratsiyasi juda yuqori. Boshqa tahlil usullari bilan tekshirilgandan so'ng, dumaloq hujayralardagi yuqori Na va past K, mitoxondriyadagi yuqori Ca ning hujayralarni ajratish jarayonida hujayra membranasining shikastlanishi bilan bog'liqligi isbotlangan. Hujayralar va to'qimalarni sovuq fiksatsiya qilish usuli ko'pincha ularni avval o'chirish va tuzatish, so'ngra ularni suyuq azotda saqlashdir. Saqlash effekti uchun söndürme va fiksatsiya juda muhimdir. Tirik hujayralar yoki yangi to'qimalar suvga boy. Söndürme paytida, kriyojen bilan bevosita aloqada bo'lgan hujayralar yoki to'qimalarning qismlari (ayniqsa, suyuq azot bilan o'chirilganda) avval muzlatiladi va mahkamlanadi, shu bilan "qobiq" hosil bo'ladi, bu esa hujayralarning markaziy qismi ezilgan. va sovuq o'rnatilgan. Shuning uchun, X-chiziq mikro-hududini tahlil qilishda, ko'pincha kattaroq hujayralar markazida muz kristallari borligi aniqlanadi. Buning oldini olish uchun ezilgan sovutgich sifatida erish nuqtasi suyuq azotdan yuqori, lekin quruqligi -806c dan past bo'lgan modda ishlatiladi. Bunday moddalar juda ko'p, lekin eng oson va eng arzoni konsentrlangan propandir (qaynoq harorati - 42.120c, erish nuqtasi - 187.10c, molekulyar og'irligi 44.1), sovutish tezligi ham eng tezdir. Ammo uning kamchiligi yonuvchanligidir.
Biologik mikroskop mushak tolasini maxsus ramkaga qo'yishi mumkin. Mushak tolasining qisqarishi ma'lum bir fazaga yetganda va uni tuzatish kerak bo'lganda, uni o'chirish va tuzatish uchun mushak tolasiga suyuq propanni purkash uchun nozul darhol ishga tushiriladi. Keyin mushak tolalari ramka bilan birga chiqarilib, suyuq azotga solingan. Agar qon hujayralari yoki ajratilgan hujayralar mahkamlangan bo'lsa, hujayralarni konsentratsiyalash uchun avval past tezlikda santrifüj qiling, hujayralarni issiqlik o'tkazuvchanligi yaxshi bo'lgan kichik kumush naychaga o'tkazing, naychani suyuq propanga joylashtiring va uni mahkamlash uchun muzlatib qo'ying. Xoll laboratoriyasida kalamush oshqozon osti bezini mahkamlashda avval ikkita po'lat blokni suyuq geliy (yoki suyuq azot) bilan oldindan sovutib oling, ikkita mis blokni forseps bilan mahkamlang va bachadon bezini o'chirish va mahkamlash uchun ularni oshqozon osti bezi oldiga va keyin joylashtiring. . To'qimalar yoki hujayralar o'chirilishi va mahkamlanishi va keyin uzoq muddatli saqlash uchun suyuq azotga o'tkazilishi mumkin.
