Multifotonli lazerli skanerlash mikroskopining afzalliklari va kamchiliklari
Multifotonli lazerli skanerlash mikroskopiyasi lazerli skanerlash mikroskopiyasi texnologiyasiga asoslangan eksperimental usul bo'lib, uch o'lchamli kuzatishda aniqroq optik kesma imkoniyatlarini ta'minlaydi. Multifotonli floresan qo'zg'atish usuli namunalarning yuqori aniqlikdagi floresan tasvirlarini to'plash uchun uzun to'lqinli qizil yorug'lik yoki yaqin infraqizil nurlardan foydalanadi, bu tirik namunalarga minimal zarar etkazadi, shuning uchun u tirik hujayralarni ko'rish uchun javob beradi, ayniqsa qalin tirik to'qimalar uchun. miya bo'laklari, embrionlar, butun organlar yoki hatto butun organizmlarni tasvirlash tadqiqotlari.
Afzalliklar quyidagilardan iborat:
1. Qizil nur yoki infraqizil yorug'lik bilan hayajonlangan, yorug'lik tarqalishi kichik (kichik zarrachalarning tarqalishi to'lqin uzunligining to'rtinchi kuchiga teskari proportsionaldir).
2. Pin teshigiga ehtiyoj yo'q va tasvirlash bo'limidan ko'proq tarqoq fotonlarni to'plash mumkin.
3. Pin teshigi fokusdan tashqari yoki fokus maydonidan chiqarilgan tarqoq fotonlarni ajrata olmaydi va chuqur qatlamlarda ko'p fotonli tasvirlashning signal-shovqin nisbati yaxshi.
4. Bir fotonli qo'zg'alish uchun ishlatiladigan ultrabinafsha yoki ko'rinadigan yorug'lik nurning fokus tekisligiga etib borishidan oldin namuna tomonidan osongina so'riladi va zaiflashadi va chuqur qatlamlarni qo'zg'atish oson emas.
5. Biologik mikroskop bilan kuzatish nuqtai nazaridan, birinchi navbatda organizmning faol holatiga zarar yetkazmaslik, suv, ion konsentratsiyasi, kislorod va ozuqa moddalarining aylanishini ta'minlash kerak. Yorug'likni kuzatishda issiqlik va foton energiyasi nurlanish miqdori va hujayralarga zarar bermaydigan yorug'lik energiyasi ichida qolishi kerak.
6. Multifotonli mikroskopiya ham juda ko'p afzalliklarga ega. Uch o'lchamli ruxsat, chuqur kirib borish, tarqalish samaradorligi, fon yorug'ligi, signal-shovqin nisbati, nazorat va boshqalar kabi lazer mikroskoplari o'tmishda mavjud bo'lmagan yoki tengsiz bo'lgan ustun xususiyatlar mavjud.
Multifotonli konfokal lazerli skanerlash mikroskopiyasi turli tadqiqot va dastur sohalariga kengaytirilgan. U tabiiy holatda namunalarni uch o'lchovli buzilmaydigan kuzatishni amalga oshirishi va tizimning ruxsati va signal-shovqin nisbatini yaxshilashi mumkin. Multifotonli qo'zg'atuvchi materiallardan foydalanish, shuningdek, uch o'lchamli balandlikdagi ma'lumotlarni saqlash va yuqori dastur qiymatiga ega bo'lgan uch o'lchamli o'zboshimchalik yo'nalishidagi mikrofabrikani amalga oshirishi mumkin. Ko'p fotonli konfokal mikroskopiya bilan bog'liq bo'lgan mashinalar, materiallar va lazer texnologiyasining yanada rivojlanishi bilan ko'proq foton konfokal lazerli skanerlash mikroskoplari yanada ko'proq rivojlanadi va kengroq qo'llaniladi, deb ishoniladi.
Kamchiliklari quyidagilardan iborat:
1. Faqat floresan tasvirlash uchun.
2. Agar namuna pigmentlar kabi qo'zg'atuvchi nurni o'ziga singdira oladigan xromoforlarni o'z ichiga olsa, namuna termal shikastlangan bo'lishi mumkin.
3. Ruxsat bir oz kamayadi. Bir vaqtning o'zida konfokal diafragma yordamida uni yaxshilash mumkin bo'lsa-da, signal yo'qoladi.
4. Qimmatbaho ultrafast lazerlarning cheklanishi tufayli multifotonli skanerlash mikroskopining narxi nisbatan yuqori.
